Volume van mobiele en stationaire fase en pakkingsgraad
Moderator: ArcherBarry
- Berichten: 11
Volume van mobiele en stationaire fase en pakkingsgraad
Hallo,
Wij hebben onlangs met de HPLC gewerkt en dienen uit te rekenen wat het volume van de mobiele fase (Vm). Het monster wat we hadden geinjecteerd was 5% uracil in methanol, de volgende tijd van de onvertraagde component tm is daaruit gebleken: 1.294 min (of 0,384????)
Ik heb geen idee hoe ik hieruit het volume van de mobiele fase kan berekenen.
Aan de hand van dat volume van de mobiele fase (Vm) én het volume van de kolom (te berekenen uit de afmetingen) zouden we daarna het volume van de stationaire fase en de pakkingsgraad (=percentage stationaire fase) kunnen bepalen.
Nog een aantal waardes:
Flow 1,0 mL/min
Kolom: 5µm 4,6 x 150 mm
Alvast bedankt
Chromatogram Uracil
Wij hebben onlangs met de HPLC gewerkt en dienen uit te rekenen wat het volume van de mobiele fase (Vm). Het monster wat we hadden geinjecteerd was 5% uracil in methanol, de volgende tijd van de onvertraagde component tm is daaruit gebleken: 1.294 min (of 0,384????)
Ik heb geen idee hoe ik hieruit het volume van de mobiele fase kan berekenen.
Aan de hand van dat volume van de mobiele fase (Vm) én het volume van de kolom (te berekenen uit de afmetingen) zouden we daarna het volume van de stationaire fase en de pakkingsgraad (=percentage stationaire fase) kunnen bepalen.
Nog een aantal waardes:
Flow 1,0 mL/min
Kolom: 5µm 4,6 x 150 mm
Alvast bedankt
Chromatogram Uracil
- Berichten: 1
Re: Volume van mobiele en stationaire fase en pakkingsgraad
Hoi Bert,
Ik weet niet welke van de retentietijden je gaat gebruiken (1,294 of 0.384)
In elk geval,
Tm is een onvertraagd component gezien deze geen affiniteit heeft met de kolom. De tijd dat het duurt om de kolom uit te komen hangt dus puur af van de volume van de kolom + flow.
De volume van de Mobiele Fase Vm = Retentietijd Tm * Flow
Voor de berekening van de stationaire fase:
Je weet hoe groot je kolom is en dat er er maar zoveel Vm erin kan.
dus:
Totaal volume - Vm = Volume stationaire fase
Vanaf hier denk ik wel dat je de % stationaire fase wel verder kan berekenen.
Ik weet niet welke van de retentietijden je gaat gebruiken (1,294 of 0.384)
In elk geval,
Tm is een onvertraagd component gezien deze geen affiniteit heeft met de kolom. De tijd dat het duurt om de kolom uit te komen hangt dus puur af van de volume van de kolom + flow.
De volume van de Mobiele Fase Vm = Retentietijd Tm * Flow
Voor de berekening van de stationaire fase:
Je weet hoe groot je kolom is en dat er er maar zoveel Vm erin kan.
dus:
Totaal volume - Vm = Volume stationaire fase
Vanaf hier denk ik wel dat je de % stationaire fase wel verder kan berekenen.