Springen naar inhoud

[praktijk biochemie]verklaring formule eiwitconcentratie


  • Log in om te kunnen reageren

#1

marloes

    marloes


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 31 maart 2006 - 15:14

Hai,

Ik ben bezig met een verslag, hierin moet ik ook de volgende formule verklaren

Ceiwit = 1,55 * A280 * 0,76 * A260
Hierbij staat C voor eiwitconcentratie
A280 voor het absorptiemaximum van eiwitten op 280 nm
A260 voor het absorptiemaximum van DNA op 260 nm

Maar ik snap niet waar 1,55 en 0,76 voor staan, en wat DNA te maken heeft met de eiwitconcentratie.

Ik hoop dat iemand mij kan helpen, bedankt alvast.
Bij gebrek aan beter: .

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

Wouter_Masselink

    Wouter_Masselink


  • >5k berichten
  • 8246 berichten
  • VIP

Geplaatst op 31 maart 2006 - 21:42

DNA heeft hier niets mee te maken. Je formule is trouwens ook verkeerd.
De formule die je moet gebruiken: Ceiwit(mg/ml) = 1,55 A280 nm-0,76 A260 nm

Een grotere sensitiviteit wordt bereikt met de formule:
Ceiwit(mg/ml) = (A224 nm - A223,3nm)/5,01.

Deze formules worden gepostuleerd, ze zijn experimenteel aangetoond, neem aan dat deze kloppen.

peptide bindingen hebben een absorptie maximum op 192 nm, dat is 2 orders groter dan die van aromatische aminozuren op 280 nm. Echter wanneer men op 192 nm gaat meten, dan heeft men te maken met verstoring door absorbatie van het licht door O2.

Een heel handig boek omtrend bijna alle biochemische methoden met heldere achtergronden is: biochemical methods van A. Pingoud; C. Urbanke; J. Hoggett en A. Jeltsch.
"Meep meep meep." Beaker

#3

Dalton

    Dalton


  • >250 berichten
  • 808 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 31 maart 2006 - 23:01

[quote="marloes"]
Maar ik snap niet waar 1,55 en 0,76 voor staan, en wat DNA te maken heeft met de eiwitconcentratie.
[quote]

De A280 hangt alleen af van een paar aminozuren zoals tryptofaan.
Ieder eiwit heeft een andere combinatie van aminozuren.
Dus stel dat 1 eiwit voor 20% uit tryptofaan bestaat en een ander eiwit dat net zo groot is voor 5%, dan zal de A280 van het eerste eiwit 4x zo hoog zijn, terwijl de concentratie hetzelfde is.
Dus daar komt die 1,55 vandaan.
Een A280 van 1,55 betekend 1 mg/ml eiwit in een zuiver preparaat.





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures