Hallo,
Ik heb een practica waarbij SDS-PAGE ga doen met vissen...
Ik moet een stroomschema maken en ik weet niet waarvoor sommige stoffen dienen in de oplossingen die ik moet maken....
Oplossingen:
* Sample-buffer: Ingevroren in epjes van 1,5 ml
1,88 ml TRIS oplossing pH 6,8 (121 g Tris per liter, pH 6,8 (~83 ml HCL (12M))
6,0 ml demiwater
3,0 ml glycerol
231 mg Dithiotreitol (DTT) Helpt om zoveel mogelijk SDS te absorberen dat de eigen ladingen geen belangrijke rol meer spelen en dat ze volledig ontvouwen zijn.
2,0 mg Broomfenolblauw per 15 ml Dient als marker en kleurt alles irreversibel blauw.
Aanvullen met demiwater tot 15 ml
* SET-buffer (bewaren in koelkast)
0,25 M Sucrose
1mM EDTA (ethyleen-diamine-tetra-azijnzuur)
1mM TRIS
* Ontkleuringsvloeistof
96% methanol oplossing: 4 delen (40%)
10% ijsazijn-oplossing: 1 deel (10%)
Demiwater : 5 delen (50%)
* Coomasie Briljant Blue-oplossing:
40% methanol, 10% ijsazijn, 0,25 w/v% Coomassie Briljant Blue R-250
* TGS 1x: (de 10x TGS 10 keer verdunnen)
25 mM Tris
192 mM glycine
0,1% (w/v) SDS pH 8,3
* SDS 0,1%
Los 1 g SDS op in 10 ml demiwater (rustig roeren) SDS ontvouwt het eiwit (H-bruggen worden verbroken) en krijgt het een negatieve lading.
Mijn vraag is: Waarom gebruik ik de SET-buffer (ik zie nergens in mijn voorschrift waarvoor ik het moet gebruiken)??
Wat is het verschil tussen het kleuren met CBB en zilverkleuring??
Waarvoor gebruik ik in de sample-buffer glycerol en in de TGS glysine??
TGS doe ik in de electroforese bak, maar wat doet deze oplossing precies??
Wie kan mij opweg helpen met antwoorden of internetsites???
Alvast heel erg bedankt....
Laatste berichten
- 08:29 Programmeren met vectoren 5
- 23:12 speciale rel. theorie 10
- 22:57 Straatklok loopt 5 minuten voor 11
- 22:57 wig 6
- 22:36 Gravity and gravitation 4
- 22:24 [scheikunde] vraag Chemie - wat is de oplossing? 10
- 19:47 Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 10
- 19:44 Vogels in de stad zijn goede klussers 2
- 19:12 Rood laserlicht 3
- 17:30 Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
- 16:34 [wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
- 13:57 do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
- 13:16 geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
- 13:12 [natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
- 10:15 2013 – Augustus Vraag 3 3
- 24 apr Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
- 24 apr positie 2
- 24 apr Schroefdraad berekening 8
- 24 apr [scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
- 23 apr Weerfrustratie 9
Nieuwsberichten
- 04 mar Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
- 31 okt AI kan via stem diabetes vaststellen 11
- 21 okt Einstein krijgt wéér gelijk 45
- 07 feb witter dan wit 20
- 19 jun irrigatie en de aardas