Er wordt voortduren gesproken over gentherapie e.d. , maar nergens wordt er deftig uitgelegd hoe ze het gen nu precies in een virus/andere vector brengen...
Wordt er gebruik gemaakt van promoters ofzo?
Graag wat correcte uitleg.
Bedankt
Laatste berichten
-
19:47
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord
-
15:28
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
12:51
positie 2
-
10:44
Schroefdraad berekening 8
-
00:15
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
21:15
Weerfrustratie 9
-
23 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
23 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
-
21 apr
speciale rel. theorie 5
-
21 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Genetica: hoe gen in vector brengen?
Moderator: ArcherBarry
Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
-
- Berichten: 19
Re: Genetica: hoe gen in vector brengen?
inderdaad
En hoe vervoert en levert de vecter het gen af?
jef
En hoe vervoert en levert de vecter het gen af?
jef
and when I see you, I really see you upside down ...
godvolkoffie. --> jef
godvolkoffie. --> jef
-
- Berichten: 8.557
Re: Genetica: hoe gen in vector brengen?
De vector levert het gen af op verschillende manieren. Vaak kunnen plasmiden via electroporatie of een andere techniek worden ingebracht. Wanneer een virus vector wordt gebruikt dan zal dit virus zich net zoals in de natuur de gastheer cel infecteren. Wanneer je te maken het met een retro-virus (zoals gebruikelijk bij gen-therapie) dan zal deze vector zich in het chromosomaal DNA van de gastheercel plaatsen.jefcox schreef:inderdaad
En hoe vervoert en levert de vecter het gen af?
jef
Een promotor zal altijd worden gebruikt. Anders zal je insert niet worden afgelezen. Ik vindt je vraag verder vrij onduidelijk. Kan je een iets gerichtere vraag stellen?
"Meep meep meep." Beaker
-
- Berichten: 5
Re: Genetica: hoe gen in vector brengen?
OK dus je hebt een schaaltje met virussen, adenovirussen bijvb. en je hebt een gen dat je hebt kunnen afzonderen. Dan meng je gewoon beiden met een promoter bijvb. deze van Herpes Simplex en het is gebeurt? Het gen gaan zich dan automatisch in het genoom van het virus aansluiten?
-
- Berichten: 8.557
Re: Genetica: hoe gen in vector brengen?
Nee, zo makkelijk is het niet. Uitgaande van een plasmide (idee is hetzelfde als een virus, alleen zonder eiwit envelop), dan bevat deze al een promotor. Er is dus een startsite (atc) bekend. Deze kan worden gedigesteerd met bijvoorbeeld NcoI. Hierna moet nog een andere digestie worden uitgevoerd van de plasmide. Let er hierbij op dat je een restrictie enzym kiest welke in dezelfde buffer werkt als je eerste restrictie enzym (NcoI), maar 1 keer in je plasmide knipt en het liefst stiky-ended.OK dus je hebt een schaaltje met virussen, adenovirussen bijvb. en je hebt een gen dat je hebt kunnen afzonderen. Dan meng je gewoon beiden met een promoter bijvb. deze van Herpes Simplex en het is gebeurt? Het gen gaan zich dan automatisch in het genoom van het virus aansluiten?
Vervolgens voer je een PCR uit van je targetgen. Dit doe je met primers die je zo hebt ontworpen dat je restrictiesites toevoegd aan je plasmide welke overeenkomen met de restrictiesites welke al in je plasmide zijn gedigesteerd. Deze digesteer je ook.
Nadat alles is gezuiverd dan kan je het target gen en je plasmide bij elkaar brengen en aan elkaar ligeren met behulp van ligase.
Het is niet verstandig om een aparte promotor aan je plasmide toe te voegen. Dit maakt het allemaal veel gecompliceerder.
"Meep meep meep." Beaker
