Ion Exchange Chromatography

Moderator: ArcherBarry

Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
Reageer

Ion Exchange Chromatography

Hoi,

Weet iemand wat meer info over IEC m.b.t. het zuiveren van eiwitten?

Klopt het dat de pI waarde van belang is?

alvast bedankt.

Berichten: 704

Re: Ion Exchange Chromatography

ja pI waarde is van belang.

zo heb je bij een bepaalde pH een lading van je eiwit. Als je dan een buffer toe gaat voegen met een te lage/te hoge pH dan heeft je eiwit een verkeerde lading en kan hij worden gebonden door de ionenwisselaar.

Heb dat laatst moeten doen en is heel easy. Als je de pI-waarde van je te zuiveren eiwit weet, dan weet je genoeg.

Bijvoorbeeld je wilt ADH bepalen. Deze heeft een pI van 5,4. Dat betekent dus dat boven de pH = 5,4 je ADH een totale lading heeft die negatief is. Dan kun je bijvoorbeeld een fosfaatbuffer pH = 7,0 toevoegen en dan een kathionenwisselaar toevoegen. Deze bindt positief geladen eiwitten bij pH = 7,0 en je ADH gaat door de kolom heen. Zo heb je dus je ADH gezuiverd. Let wel op dat er ook andere eiwitten zijn die toch in je ADH-oplossen komen.

Reageer