Laatste berichten
-
18:15
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 8
-
17:30
Herleiden afmetingen vanaf een foto 21
-
16:34
[wiskunde] Prijs Product per KG; Alternatief Inzicht 3
-
14:55
wig
-
13:57
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 9
-
13:16
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 17
-
13:12
[natuurkunde] kroon van koning op Syracuse 10
-
12:01
Gravity and gravitation 1
-
10:15
2013 – Augustus Vraag 3 3
-
23:07
Rood laserlicht 2
-
24 apr
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
24 apr
positie 2
-
24 apr
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
lactaatdehrogenase zuiveren uit kipfilet
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 3
lactaatdehrogenase zuiveren uit kipfilet
wie kan mij helpen met het zoeken over methodes hoe ik ldh kan zuiveren uit kipfilet. of heeft er een van jullie misschien al info over dit onderwerp??????????
-
- Berichten: 337
Re: lactaatdehrogenase zuiveren uit kipfilet
Beste Gulistan, welkom op Chemieforum.nl!
Na het homogeneren en fractioneren van het weefsel in ijskoude buffer kan tot scheiden worden overgegaan. Een goede methode om LDH te zuiveren is met kolomchromatografie, te weten: GPC (gelpermeatie chromatografie: scheiding op grootte), affiniteitschromatografie (met een gelinkt substraat aan de matrix), of IEC (ion exchange chromatografie). Ook goede zuiveringsmethodes zijn met ammoniumsulfaat waardoor denaturatie van andere eiwitten plaatsvind en deze precipiteren (neerslaan). Elk eiwit slaat namelijk bij een karakteristieke concentratie van ammoniumsulfaat neer.
De ervaring leert dat de combinatie van technieken de beste resultaten oplevert, maar natuurlijk ook het meeste tijd kost. Gewoonweg worden de exclusiestappen met ammoniumsulfaat als eerste uitgevoerd omdat je hiermee de grootste hoeveelheid aan overbodige eiwitten dumpt. Hierna zou gelpermatie een logische stap zijn, gevolg door ion exchange. Uiteindelijk kan affiniteitschromatografie gebruikt worden om het zo LDH zuiver mogelijk te krijgen. Vanwege de lage kolomcapaciteit en aanwezigheid van andere enzymen die hetzelfde substraat hebben (vaak gebruik als een NAD+ lookalike gelinkt aan de matrix: AMP-agarose) is het niet aan te raden deze techniek gelijk op je homogenaat los te laten. Laat even weten WAT voor zuivering je precies wilt uitvoeren, want het is niet echt handig om alle technieken uitvoerig toe te lichten.
Ik heb je onderwerp even verplaats naar de sectie scheidingsmethoden, zoals je ziet
Na het homogeneren en fractioneren van het weefsel in ijskoude buffer kan tot scheiden worden overgegaan. Een goede methode om LDH te zuiveren is met kolomchromatografie, te weten: GPC (gelpermeatie chromatografie: scheiding op grootte), affiniteitschromatografie (met een gelinkt substraat aan de matrix), of IEC (ion exchange chromatografie). Ook goede zuiveringsmethodes zijn met ammoniumsulfaat waardoor denaturatie van andere eiwitten plaatsvind en deze precipiteren (neerslaan). Elk eiwit slaat namelijk bij een karakteristieke concentratie van ammoniumsulfaat neer.
De ervaring leert dat de combinatie van technieken de beste resultaten oplevert, maar natuurlijk ook het meeste tijd kost. Gewoonweg worden de exclusiestappen met ammoniumsulfaat als eerste uitgevoerd omdat je hiermee de grootste hoeveelheid aan overbodige eiwitten dumpt. Hierna zou gelpermatie een logische stap zijn, gevolg door ion exchange. Uiteindelijk kan affiniteitschromatografie gebruikt worden om het zo LDH zuiver mogelijk te krijgen. Vanwege de lage kolomcapaciteit en aanwezigheid van andere enzymen die hetzelfde substraat hebben (vaak gebruik als een NAD+ lookalike gelinkt aan de matrix: AMP-agarose) is het niet aan te raden deze techniek gelijk op je homogenaat los te laten. Laat even weten WAT voor zuivering je precies wilt uitvoeren, want het is niet echt handig om alle technieken uitvoerig toe te lichten.
Ik heb je onderwerp even verplaats naar de sectie scheidingsmethoden, zoals je ziet
-
- Berichten: 38
Re: lactaatdehrogenase zuiveren uit kipfilet
He, dezelfde opdracht hebben wij ook van school gekregen. Alleen moeten wij LDH-1 uit runderhart zuiveren.
Mijn interesse gaat voornamelijk uit naar het ontzouten met ammoniumsulfaat, het zuiveren met behulp van ionchromatografie. Gelchromatografie zou ook een zeer welkome aanvulling zijn.
Ik hoop dat jullie me kunnen helpen en dat het niet teveel moeite is.. In ieder geval alvast bedankt!
Mijn interesse gaat voornamelijk uit naar het ontzouten met ammoniumsulfaat, het zuiveren met behulp van ionchromatografie. Gelchromatografie zou ook een zeer welkome aanvulling zijn.
Ik hoop dat jullie me kunnen helpen en dat het niet teveel moeite is.. In ieder geval alvast bedankt!
