Standaardaddtie berekenings formule
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 50
Standaardaddtie berekenings formule
Ik heb een standaard additie brpaling op de HPLC uitgevoerd.
Nu moet ik mijn gehalte stof in het orginele monster berekenen.
De formule moet ik eigenlijk weten. Ik ben het straal vergeten. Mijn aantekeningen en boek heb ik ook niet meer dus kan ik het niet opzoeken.
Kan iemand mij vertellen wat de formule is voor het berekenen van het gehalte analiet in het monster?
Nu moet ik mijn gehalte stof in het orginele monster berekenen.
De formule moet ik eigenlijk weten. Ik ben het straal vergeten. Mijn aantekeningen en boek heb ik ook niet meer dus kan ik het niet opzoeken.
Kan iemand mij vertellen wat de formule is voor het berekenen van het gehalte analiet in het monster?
-
- Berichten: 328
Re: Standaardaddtie berekenings formule
Doe je dat niet door een grafiekje te maken, de formule van die lijn te bepalen en dan door y = 0 in te vullen de x te berekenen (waarbij x de concentratie van je analiet is)?
-
- Berichten: 677
Re: Standaardaddtie berekenings formule
Zet op de x-as de concentratie van de standaard uit
Zet op de y-as de piekoppervlakte van de standaard uit, gedeeld door de piekoppervlakte van de inwendige standaard.
Bepaal de beste rechte met lineaire regressie, en de concentratie van de onbekende door interpolatie.
In formulevorm:
Hierin is (x) de onbekende component en (is) de inwendige standaard. RF is de responsfactor.
Vaak wordt het verschil in RF tussen (x) en (is) verwaarloosd, en wanneer je voor alle standaardoplossingen dezelfde hoeveelheid (is) neemt, kan je dat ook weglaten. Je krijgt dan de eenvoudige methode, zoals hierboven.
Jorim: Formule even leesbaar gemaakt.
Zet op de y-as de piekoppervlakte van de standaard uit, gedeeld door de piekoppervlakte van de inwendige standaard.
Bepaal de beste rechte met lineaire regressie, en de concentratie van de onbekende door interpolatie.
In formulevorm:
Code: Selecteer alles
opp (x)
-----------
RF(x)
x = --------------------- * hoeveelheid (is)
opp (is)
----------
RF(is)
Vaak wordt het verschil in RF tussen (x) en (is) verwaarloosd, en wanneer je voor alle standaardoplossingen dezelfde hoeveelheid (is) neemt, kan je dat ook weglaten. Je krijgt dan de eenvoudige methode, zoals hierboven.
Jorim: Formule even leesbaar gemaakt.
-
- Berichten: 50
Re: Standaardaddtie berekenings formule
Bedankt voor de reacties.
Het volgende heb ik gedaan.
Massa monster = 123,0 mg opgelost in 50,00 ml.
Hieruit wordt 5,00 ml gepipetteerd in een maatkolf van 10,00 ml. Vervolgens wordt hieraan 5,00 ml standaard toegevoegd.
Reeks
c standaard (μg/ml): 0, 20, 40, 100
Vmonster = 5,00 ml
Vstandaard = 5,00ml
Vtotaal= 10,00 ml
Injectievolume = 20 μl. Dit komt overeen met 0.02 ml.
Van de standaardaddtie bepaling op de HPLC heb ik de het piekoppervlak (y-as) uitgezet tegen de concentratie standaard (x-as). De volgende vergelijking is er verkregen.
y= 34146x+3000000 waarbij R2= 0.9981
y is het piekoppervlak in μvolt.seconden
x is de concentratie stof in μg/ml
De grafiek heb ik geextrapoleerd d.m.v een berekening.
hierbij y=0 dan is
x= (3000000/34146)= 87,86 μg/ml
Verdunningsfactoren zijn volgens mij 10,00/ 0,02 (= injectievolume); 10,00/5,00 en 50,00/ 5,00.
87,86 μg/ml = 0.08786mg/ml. In het injectievolume zit 0,08786*0,02= 0.001757 mg.
In de maatkolf van 10,00 ml zit 0,001757 * (10,00/0,02)= 0,8786 mg.
In 5,00 ml orginele monster zit 0,8786 * (10,00/5,00)= 1,7575 mg.
In 50,00 ml zit 1,7575*(50,00/5,00)= 17,57 mg
massafractie = 17,57/123= 0,1428 mg/mg
Ik wil weten wat de massafractie (mg/mg) stof in het monster is.
De massafractie moet tussen de 0,016 - 0,068 mg/mg liggen.
Zelf kom ik kom uit op een massafractie van 0.1428 mg/mg.
Ik weet niet precies waar mijn fout ligt. Wat heb ik verkeerd gedaan?
Het volgende heb ik gedaan.
Massa monster = 123,0 mg opgelost in 50,00 ml.
Hieruit wordt 5,00 ml gepipetteerd in een maatkolf van 10,00 ml. Vervolgens wordt hieraan 5,00 ml standaard toegevoegd.
Reeks
c standaard (μg/ml): 0, 20, 40, 100
Vmonster = 5,00 ml
Vstandaard = 5,00ml
Vtotaal= 10,00 ml
Injectievolume = 20 μl. Dit komt overeen met 0.02 ml.
Van de standaardaddtie bepaling op de HPLC heb ik de het piekoppervlak (y-as) uitgezet tegen de concentratie standaard (x-as). De volgende vergelijking is er verkregen.
y= 34146x+3000000 waarbij R2= 0.9981
y is het piekoppervlak in μvolt.seconden
x is de concentratie stof in μg/ml
De grafiek heb ik geextrapoleerd d.m.v een berekening.
hierbij y=0 dan is
x= (3000000/34146)= 87,86 μg/ml
Verdunningsfactoren zijn volgens mij 10,00/ 0,02 (= injectievolume); 10,00/5,00 en 50,00/ 5,00.
87,86 μg/ml = 0.08786mg/ml. In het injectievolume zit 0,08786*0,02= 0.001757 mg.
In de maatkolf van 10,00 ml zit 0,001757 * (10,00/0,02)= 0,8786 mg.
In 5,00 ml orginele monster zit 0,8786 * (10,00/5,00)= 1,7575 mg.
In 50,00 ml zit 1,7575*(50,00/5,00)= 17,57 mg
massafractie = 17,57/123= 0,1428 mg/mg
Ik wil weten wat de massafractie (mg/mg) stof in het monster is.
De massafractie moet tussen de 0,016 - 0,068 mg/mg liggen.
Zelf kom ik kom uit op een massafractie van 0.1428 mg/mg.
Ik weet niet precies waar mijn fout ligt. Wat heb ik verkeerd gedaan?
-
- Berichten: 677
Re: Standaardaddtie berekenings formule
Ik heb in mijn vorig antwoord standaard additie verward met inwendige standaard, sorry.
Bij standaard additie zet je de piekoppervlakte (y-as) uit tov de toegevoegde hoeveelheid standaard, meestal in volume.
In jouw geval zet je dus in de x-as 0, 100, 200, 500 µg uit, want dit is de juiste hoeveelheid standaard die je hebt toegevoegd. (5 mL * de conc van elke standaard.
Bepaal nu het afgesneden stuk op de x-as (dus: bij y = 0)
Dit afgesneden stuk is de hoeveelheid onbekende in je monster, in dezelfde eenheden als waar je de standaarden in hebt uitgezet.
Je hoeft geen rekening te houden met het injectievolume, want dat is toch voor alle injecties hetzelfde.
Bij standaard additie zet je de piekoppervlakte (y-as) uit tov de toegevoegde hoeveelheid standaard, meestal in volume.
In jouw geval zet je dus in de x-as 0, 100, 200, 500 µg uit, want dit is de juiste hoeveelheid standaard die je hebt toegevoegd. (5 mL * de conc van elke standaard.
Bepaal nu het afgesneden stuk op de x-as (dus: bij y = 0)
Dit afgesneden stuk is de hoeveelheid onbekende in je monster, in dezelfde eenheden als waar je de standaarden in hebt uitgezet.
Je hoeft geen rekening te houden met het injectievolume, want dat is toch voor alle injecties hetzelfde.
-
- Berichten: 50
Re: Standaardaddtie berekenings formule
O neee,
Waneer ik de concentraties die jij hebt genoemd uitzet in een grafiek. Dan klopt de lijn niet meer. De R2 wordt dan 0.9322.
Wat ik uit je verhaal begrijp Jooken, is dat ik eigenlijk te hoge concentraties standaarden heb gebruikt. Omdat het gehalte tussen de 0.016 en 0.068 mg/mg ligt.
Kan dit kloppen?
Wanneer dit klopt kan ik zonder dat ik de anlyse opnieuw moet uitvoeren dit allemaal herstellen?
Waneer ik de concentraties die jij hebt genoemd uitzet in een grafiek. Dan klopt de lijn niet meer. De R2 wordt dan 0.9322.
Wat ik uit je verhaal begrijp Jooken, is dat ik eigenlijk te hoge concentraties standaarden heb gebruikt. Omdat het gehalte tussen de 0.016 en 0.068 mg/mg ligt.
Kan dit kloppen?
Wanneer dit klopt kan ik zonder dat ik de anlyse opnieuw moet uitvoeren dit allemaal herstellen?
-
- Berichten: 677
Re: Standaardaddtie berekenings formule
Kan je alles een sdoorsturen?
de volledige modus operandi, manier van oplossingen maken en verdunnen, ...
Stuur maar naar etienne.jooken[at]khbo.be
Beryllium: emailadres even spam-proof gemaakt
de volledige modus operandi, manier van oplossingen maken en verdunnen, ...
Stuur maar naar etienne.jooken[at]khbo.be
Beryllium: emailadres even spam-proof gemaakt