Hallo,
Ik heb navraag gedaan hoe je kolommen in principe op moet slaan, conserveren. Nu blijkt dat we in het verleden dit niet precies volgens de regels hebben gedaan.
Als we nu de kolommen willen spoelen hoe doe je dit en wat zijn de risico's.
We hebben drie soorten kolommen in gebruik. De nova pack C18, de symmetry C8 en de symmetry Shield C18.
Wie kan hierover iets vertellen??
Laatste berichten
-
22:54
Herleiden afmetingen vanaf een foto 12
-
18:53
Ik wil studeren via afstandsonderwijs, kennen jullie Tech?
-
18:09
Rotatie van het heelal 32
-
17:19
Ervaringen met "herontdekkingen" 12
-
18 apr
hall effect in vloeistof gebruiken als stromingssensor 6
-
18 apr
Gezocht: de/een naam voor een getallenrij met een cauchyrij als partieelsommenrij
-
18 apr
Casus uit de praktijk: positief test THC 18
-
17 apr
speciale rel. theorie 4
-
17 apr
Vreemde stank in huis 11
-
17 apr
3 vragen over mijn rooskleurige r.berekening H2netGekoppeldeHBrflowbatterij.
-
17 apr
Interpretatie reactie-energie 3
-
17 apr
Logistic equation (Pierre Verhulst,Belgian Mathematician) 5
-
16 apr
vB 9
-
15 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 1
-
15 apr
Python: sockets sluiten 4
-
14 apr
Een eenvoudige logische redenering waarom tijd niet kan bestaan 'daarbuiten' 6
-
14 apr
Hoe kun je op quantumwijze getallen vinden in een rij die kleiner zijn dan getal k 3
-
13 apr
Documentenverdwijnen uit onedrive 1
-
12 apr
Behoud van impulsmoment en energie 5
-
12 apr
INLOG STORING / TIPS 4
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
HPLC kolommen
Moderator: ArcherBarry
Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
-
- Berichten: 184
Re: HPLC kolommen
Opslaan van kolommen:
- bij gebruik van een buffer als eluent spoelen met water/organisch.
- bij gebruik van een organisch eluent, langzaam spoelen overgaan naar water/organisch.
eventueel spoelen met respectievelijk zuiver water of zuiver organisch, of beiden om alle polaire en apolaire resten er vanaf te spoelen.
Als laatste spoelen met 50/50 water/organisch. De kolom "nat" en afgesloten opbergen.
- bij gebruik van een buffer als eluent spoelen met water/organisch.
- bij gebruik van een organisch eluent, langzaam spoelen overgaan naar water/organisch.
eventueel spoelen met respectievelijk zuiver water of zuiver organisch, of beiden om alle polaire en apolaire resten er vanaf te spoelen.
Als laatste spoelen met 50/50 water/organisch. De kolom "nat" en afgesloten opbergen.
-
- Berichten: 238
Re: HPLC kolommen
geef de volgende keer meer uitleg!! 
wat is
Verkeerd eluens als spoelstap?
Niet dichtgeschroefd?
etc
Jouw C-8/C-18 kolommen zijn mijns inziens te spoelen met water methanol.
Dit is gebruikelijk (meestal 50:50 ofzo)
mmaarr,
wat bedoel je met:
Ik zou na een buffer spoelen met water : methanol 80 : 20 en langzaam de methanol omhoog brengen tot 50% ofzo.
Water methanol wordt veel gebruikt bij opslag van RP kolommen.
wat is
????niet precies volgens de regels
Verkeerd eluens als spoelstap?
Niet dichtgeschroefd?
etc
Jouw C-8/C-18 kolommen zijn mijns inziens te spoelen met water methanol.
Dit is gebruikelijk (meestal 50:50 ofzo)
mmaarr,
wat bedoel je met:
Met een buffer moet je erg voorzichtig zijn met de hoeveelheid organisch oplosmiddel!! Zeker Acetonitril kan dan funest zijn, omdat daarin je zouten uitkristalliseren.- bij gebruik van een buffer als eluent spoelen met water/organisch.
- bij gebruik van een organisch eluent, langzaam spoelen overgaan naar water/organisch.
Ik zou na een buffer spoelen met water : methanol 80 : 20 en langzaam de methanol omhoog brengen tot 50% ofzo.
Water methanol wordt veel gebruikt bij opslag van RP kolommen.
-
- Berichten: 238
Re: HPLC kolommen
PS: water methanol alleen bij LAGE flow gebruiken ivm HOGE druk!
-
- Berichten: 130
Re: HPLC kolommen
Hiermee bedoelde ik dat de kolommen gewoon opgeborgen werden in het eluens, dus met de evt. aanwezige buffer.niet precies volgens de regels
Dus je mag de kolommen met 100% HPLC water spoelen, Mij is namelijk verteld dat dit niet zonder risico is!!
Als je de spoelingen gedaan hebt . Hoe kun je dan controleren of dit goed verlopen is?? Of begin je gewoon te analysren en kijk je hoe dit gaat?
In ieder geval al bedankt voor bovenstaande reacties.
Groetjes
-
- Berichten: 1.153
Re: HPLC kolommen
Ja je hebt gedeeltelijk gelijk. C18 staarten kunnen samenklonteren in 100% water. Dit gebeurt altijd eigenlijk. Wil je daarna weer meten, moet je eerst je kolom reconditioneren. Dus ja je mag 100% water gebruiken, als je daarna weer reconditioneerd.Dus je mag de kolommen met 100% HPLC water spoelen, Mij is namelijk verteld dat dit niet zonder risico is!!
Wat je kan doen zijn 2 dingen. Je had het over een verontreiniging op de kolom. Ik neem aan dat je dit in een detector hebt gezien. Je kan tijdens het spoelen je kolom aan de detector vast maken en je ziet je basis lijn minder worden naarmate er meer verontreiniging uit je kolom is. 100% schoon worden zal waarschijnlijk niet lukken, dus een basis lijn van 0 zal je niet krijgen.Als je de spoelingen gedaan hebt . Hoe kun je dan controleren of dit goed verlopen is?? Of begin je gewoon te analysren en kijk je hoe dit gaat?
Daar zijn we voorIn ieder geval al bedankt voor bovenstaande reacties.
succes ermee
-
- Berichten: 238
Re: HPLC kolommen
NEE!
ik heb helemaal niet gezegd dat je kolommen mag spoelen met 100% water!!
niet doen is mijn advies!
water METHANOL mengsel gebruiken!
zeker voor opslag.
die buffer van je heeft de kolom vrijwel zeker aangetast, maar het hoeft niet dermate erg te zijn dat je kolom definitief kapot is.
eerst goed spoelen, dan vervolgens inderdaad de basislijn bekijken, maar pas nadat je minstens een half uur (beter = langer) hebt gespoeld bij constante flow. Hierna injecteer je je standaarden en check je de lineariteit.
Het beste kun je de standaarden meteen vergelijken met eerder gemeten waarden en als hoogte, retentietijd en area goed overeenkomen is er niets aan de hand.
ik heb helemaal niet gezegd dat je kolommen mag spoelen met 100% water!!
niet doen is mijn advies!
water METHANOL mengsel gebruiken!
zeker voor opslag.
die buffer van je heeft de kolom vrijwel zeker aangetast, maar het hoeft niet dermate erg te zijn dat je kolom definitief kapot is.
eerst goed spoelen, dan vervolgens inderdaad de basislijn bekijken, maar pas nadat je minstens een half uur (beter = langer) hebt gespoeld bij constante flow. Hierna injecteer je je standaarden en check je de lineariteit.
Het beste kun je de standaarden meteen vergelijken met eerder gemeten waarden en als hoogte, retentietijd en area goed overeenkomen is er niets aan de hand.
-
- Berichten: 130
Re: HPLC kolommen
Ja je hebt gedeeltelijk gelijk. C18 staarten kunnen samenklonteren in 100% water. Dit gebeurt altijd eigenlijk. Wil je daarna weer meten, moet je eerst je kolom reconditioneren. Dus ja je mag 100% water gebruiken, als je daarna weer reconditioneerd
Dat reconditioneren war houd dat in??
-
- Berichten: 130
Re: HPLC kolommen
In een boekje wat zit bij een nieuwe kolom wordt gesproken over spoelen met water van 18 megaohm.
Wat voor water is dat?????????
Wat voor water is dat?????????
-
- Berichten: 328
Re: HPLC kolommen
MilliQ water, zit nog minder zooi in als demi water.
Dan zorg je er weer voor dat die C18 staarten los van elkaar komen.Dat reconditioneren war houd dat in??
