Hoi,
Op school hebben we een HPLC staan, met een c18 kolom ( de kolom heeft een lengte van 125mm en een diameter van 3 mm). We willen PAK's gaan bepalen.
We hebben nu al een probleem, als we een bepaalde flow instellen blijkft de druk niet constant. We werken bij kamer temperatuur. Heeft iemand enige idee waar dit aan kan liggen? Heeft iemad ook enig idee wat de relatie tussen flow en druk in bar is?
Bij voorbaat dank.
Laatste berichten
-
15:19
Vraag 2009 Juli Vraag 5 4
-
12:51
positie 2
-
10:44
Schroefdraad berekening 8
-
00:15
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
21:15
Weerfrustratie 9
-
18:08
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
23 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
-
21 apr
speciale rel. theorie 5
-
21 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers
-
21 apr
Ervaringen met "herontdekkingen" 15
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Druk van HPLC niet constant
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 266
Re: Druk van HPLC niet constant
Blijft de druk constant zonder de kolom ertussen?
Is er incompatibiliteit tussen de mobiele fase die je nu laat lopen en diegene van ervoor? bv. water <-> heptaan.
Blijft de druk ook varieren als je een halfuurtje laat conditioneren met water/ACN mengsel op lage flow?
edit:
Hoe ouder een kolom hoe meer druk er nodig is voor een bepaalde flow.
Wat ook heel belangrijk is, is je deeltjesgrootte van je silica 3.5 , 1.8, 5um, ...
Dat bepaalt sterk welke druk je moet geven. Denk er wel aan dat de meeste toestellen maar tot 400 bar gaan en dat je kolom ook zijn beperkingen heeft.
Is er incompatibiliteit tussen de mobiele fase die je nu laat lopen en diegene van ervoor? bv. water <-> heptaan.
Blijft de druk ook varieren als je een halfuurtje laat conditioneren met water/ACN mengsel op lage flow?
edit:
Hoe ouder een kolom hoe meer druk er nodig is voor een bepaalde flow.
Wat ook heel belangrijk is, is je deeltjesgrootte van je silica 3.5 , 1.8, 5um, ...
Dat bepaalt sterk welke druk je moet geven. Denk er wel aan dat de meeste toestellen maar tot 400 bar gaan en dat je kolom ook zijn beperkingen heeft.
-
- Berichten: 1.153
Re: Druk van HPLC niet constant
Heb je luchtbellen ergens in je vloeistof (niet in je pot, maar in je tubing)
Heb je een lek(je)
Het makkelijkst is om vanaf achteraan steeds een deeltje los te maken en kijken of je drukschommelingen blijven bestaan. Meest voorkomend is wel je kolom.
Heb je een lek(je)
Het makkelijkst is om vanaf achteraan steeds een deeltje los te maken en kijken of je drukschommelingen blijven bestaan. Meest voorkomend is wel je kolom.
-
- Berichten: 6
Re: Druk van HPLC niet constant
An de HPLC is er wel een degasser gekoppeld, ik weet wel niet in hoeverre die nog goed werkt. De vorige keer dat we de HPLC hadden gebruikt hadden we methanol als mobiele fase gebruikt. De druk wil helemaal niet stabiliseren, we lieten het vrij lang op een constante flow(0,5ml/min 100%ACN) lopen. We kunnen wel proberen om de druk nog lager te zetten en een water ACN mengsel gebruiken. Welke eleuns samnestelling zal dan ideaal zijn?
-
- Berichten: 11.177
Re: Druk van HPLC niet constant
Het kan ook zijn dat het pompmechaniekje enigszins versleten is.
Er zit een stukje techniek in dat nog eens extra naperst als de pomp zijn volledige slag heeft gemaakt. Zoiets bij een locomotief dus. Dit is om de druk op het dode punt constant te houden, en als dat versleten is, tja.
Er zit een stukje techniek in dat nog eens extra naperst als de pomp zijn volledige slag heeft gemaakt. Zoiets bij een locomotief dus. Dit is om de druk op het dode punt constant te houden, en als dat versleten is, tja.
-
- Berichten: 1.122
Re: Druk van HPLC niet constant
Wat eigenlijk een erg belangrijke vraag is:
- Wat is de schommeling in druk bij je HPLC?
Bij een druk van 120 bar is een druk variatie van 3 a 4 bar nog 'acceptabel'.
Verder: zeker bij een hoge concentratie organisch oplosmiddel (methanol of acetonitril) kun je meer schommeling krijgen. In je pompen zitten zogenaamde 'check valves', dit zijn een soort van kogeltjes die er voor zorgen dat je na elke pomp beweging geen flow hebt in de verkeerde richting (back-flow). Bij hogere concentraties organisch oplosmiddel kunnen die 'plakkerig' worden en er daardoor voor zorgen dat je druk niet helemaal stabiel meer is.
Hóe onstabiel is natuurlijk de grote vraag in jouw geval
- Wat is de schommeling in druk bij je HPLC?
Bij een druk van 120 bar is een druk variatie van 3 a 4 bar nog 'acceptabel'.
Verder: zeker bij een hoge concentratie organisch oplosmiddel (methanol of acetonitril) kun je meer schommeling krijgen. In je pompen zitten zogenaamde 'check valves', dit zijn een soort van kogeltjes die er voor zorgen dat je na elke pomp beweging geen flow hebt in de verkeerde richting (back-flow). Bij hogere concentraties organisch oplosmiddel kunnen die 'plakkerig' worden en er daardoor voor zorgen dat je druk niet helemaal stabiel meer is.
Hóe onstabiel is natuurlijk de grote vraag in jouw geval
-
- Berichten: 6
Re: Druk van HPLC niet constant
Bij een flow van 0,5ml/min hadden we een druk van ongeveer 40 bar en de druk loopt terug tot zo'n 4 bar.
-
- Berichten: 1.122
Re: Druk van HPLC niet constant
Dat is vreemd. Een druk van 4 bar klinkt als een lek. Als je alleen alle tubing/cappilaren aan de pomp zou verbinden dan zou je ongeveer op 4 bar uit komen bij een flow van 0.5 bar.
- Begint je druk bij 40 bar en loopt deze dan langzaam terug naar 4 bar of schommelt de druk steeds tussen 40 en 4 bar? Met welke tussenposen zijn die schommelingen dan?
- Heb je goed gecontroleerd of je geen lek hebt ergens?
- Begint je druk bij 40 bar en loopt deze dan langzaam terug naar 4 bar of schommelt de druk steeds tussen 40 en 4 bar? Met welke tussenposen zijn die schommelingen dan?
- Heb je goed gecontroleerd of je geen lek hebt ergens?
-
- Berichten: 6
Re: Druk van HPLC niet constant
Voor zover ik heb kunnen zien is er geen lek.
De druk loopt op tot 40 bar, daarna begint de druk te schommelen, van 40 naar 20 kan terug lopen naar 40 daarna opeens tot 4 bar, zonder enig echte regelmaat.
De druk loopt op tot 40 bar, daarna begint de druk te schommelen, van 40 naar 20 kan terug lopen naar 40 daarna opeens tot 4 bar, zonder enig echte regelmaat.
-
- Berichten: 2.399
Re: Druk van HPLC niet constant
probeer eens te letten of de drukval bij een backstroke van de pomp gebeurd.
Ik denk eigenlijk aan de volgende dingen
-Pumpseals
-Outlet checkvalve
-Wanneer de druk valt in een pompslag, controleer dan de inlet checkvalve
Het bellen verhaal van jeroen is ook relevant, controleer je aanzuigleidingen etc. Trekt het geen bellen door een verstopt inlet filter, dat soort dingen........
Ik denk eigenlijk aan de volgende dingen
-Pumpseals
-Outlet checkvalve
-Wanneer de druk valt in een pompslag, controleer dan de inlet checkvalve
Het bellen verhaal van jeroen is ook relevant, controleer je aanzuigleidingen etc. Trekt het geen bellen door een verstopt inlet filter, dat soort dingen........
-
- Berichten: 873
Re: Druk van HPLC niet constant
luchtbellen in je systeem zijn funest dus dat is het eerste wat je moet nagaan.
Het is ook heel goed mogelijk dat je checkvalves vuil zijn en daardoor slecht afsluiten. Hierdoor kun je al druk-schommelingen krijgen.
Koppel je kolom los van de pomp en spoel het systeem een nacht met IPA (isopropanol) met een flow van 0,1 - 0,2 ml/min. Dit heeft een reinigende werking.
kijk daarna of je zonder kolom een gelijke druk krijgt met je eluens (Dit kan wel een uurtje duren).
Als het dan nog hetzelfde is (nog steeds geen luchtbellen?) dan zou een vervanging van je pumpseals een mogelijkheid zijn.
Je checkvalves kun je eventueel ook nog ultrasoon reinigen in methanol.
Het is ook heel goed mogelijk dat je checkvalves vuil zijn en daardoor slecht afsluiten. Hierdoor kun je al druk-schommelingen krijgen.
Koppel je kolom los van de pomp en spoel het systeem een nacht met IPA (isopropanol) met een flow van 0,1 - 0,2 ml/min. Dit heeft een reinigende werking.
kijk daarna of je zonder kolom een gelijke druk krijgt met je eluens (Dit kan wel een uurtje duren).
Als het dan nog hetzelfde is (nog steeds geen luchtbellen?) dan zou een vervanging van je pumpseals een mogelijkheid zijn.
Je checkvalves kun je eventueel ook nog ultrasoon reinigen in methanol.
-
- Berichten: 1.153
Re: Druk van HPLC niet constant
We kunnen hier heel kort over doen: drukval van 40 naar 4 is 95% zeker de checkvalve's van je pomp.
-
- Berichten: 6
Re: Druk van HPLC niet constant
Morgen gaaan we naar school proberen de prbleem op te lossen. We zitten alleen op vrijdage op school. Ik zal jullie wel op de hoogte houden
