Laatste berichten
-
21:34
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 8
-
21:15
Weerfrustratie 9
-
18:24
Schroefdraad berekening 5
-
18:08
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
15:53
positie
-
14:16
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
14:16
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
13:57
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
10:42
projectiel 8
-
10:37
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
09:25
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
-
21 apr
speciale rel. theorie 5
-
21 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers
-
21 apr
Ervaringen met "herontdekkingen" 15
-
20 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 19
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Dode volume van HPLC
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 31
Dode volume van HPLC
Weet iemand de formule van de dode volume en hoe bepaal je de dode volume van een apparaat(HPLC). Verder wat verwacht je van K (retentiefactor) als je op een ander apparaat werkt, met bv. Een groter dood volume.
-
- Berichten: 2.399
Re: Dode volume van HPLC
Ik ga wat tegen vragen stellen.......
Wat is dood volume in een HPLC?
Hoe denk je dan dat je het berekenen kan?
Je kunt het bepalen door je kolom tussen de injector en detector uit te halen en de tubing met een 0 dead volume connector te verbinden.
Hoe wordt de K factor berekent? Wordt er misschien gecorrigeerd voor het dode volume?
Wat is dood volume in een HPLC?
Hoe denk je dan dat je het berekenen kan?
Je kunt het bepalen door je kolom tussen de injector en detector uit te halen en de tubing met een 0 dead volume connector te verbinden.
Hoe wordt de K factor berekent? Wordt er misschien gecorrigeerd voor het dode volume?
-
- Berichten: 27
Re: Dode volume van HPLC
Zoals hierboven al in woorden staat omschreven:
dode tijd= bruto retentietijd - netto retentietijd
Meestal is er een injectiepiek te zijn, de tijd die het kost voordat de injectiepiek eruit komt heet de dode tijd.
de retentiefactor k' = netto retentietijd/dode tijd
dode tijd= bruto retentietijd - netto retentietijd
Meestal is er een injectiepiek te zijn, de tijd die het kost voordat de injectiepiek eruit komt heet de dode tijd.
de retentiefactor k' = netto retentietijd/dode tijd
-
- Berichten: 677
Re: Dode volume van HPLC
Om het dode volume van een HPLC toestel te bepalen bestaan er verschillende technieken. Van eenvoudig tot meer gesofisticeerd:
1. heel eenvoudig: de tijd van de basislijnverstoring na de injectie (Dit zie je enkel als het monster is opgelost in een ander solvent dan het eluent)
2. Vrij eenvoudig: een benaderende formule
tM = (L.dc2)/2F
met L de kolomlengte in cm; dc de kolomdiameter in cm en F het debiet in ml/min
(de precisie van deze formule is +/- 10%)
3. Een eenvoudig experiment
Injecteer uracil. Deze verbinding wordt (nagenoeg) niet weerhouden op een C18 kolom.
4. Een gesofisticeerd experiment:
Injecteer een homologe reeks van tenminste 4 verbindingen. Wij gebruiken meestal methyl- ethyl-, propyl- en butyl parabens. Maak een plot van de retentietijd van C(n+1) ten opzichte van de retentietijd van C(n) met n het aantal koolstofatomen van de homologe verbinding. Dit geeft een rechte:
tR,(n+1) = tR,(n).A - (A-1).tM
Bereken uit helling en intercept tM.
Deze laatste methode is de meest nauwkeurige, maar bedenk wel dat tM ook functie is van de samenstelling van de mobiele fase. Er bestaat dus niet één, definitieve waarde van tM
1. heel eenvoudig: de tijd van de basislijnverstoring na de injectie (Dit zie je enkel als het monster is opgelost in een ander solvent dan het eluent)
2. Vrij eenvoudig: een benaderende formule
tM = (L.dc2)/2F
met L de kolomlengte in cm; dc de kolomdiameter in cm en F het debiet in ml/min
(de precisie van deze formule is +/- 10%)
3. Een eenvoudig experiment
Injecteer uracil. Deze verbinding wordt (nagenoeg) niet weerhouden op een C18 kolom.
4. Een gesofisticeerd experiment:
Injecteer een homologe reeks van tenminste 4 verbindingen. Wij gebruiken meestal methyl- ethyl-, propyl- en butyl parabens. Maak een plot van de retentietijd van C(n+1) ten opzichte van de retentietijd van C(n) met n het aantal koolstofatomen van de homologe verbinding. Dit geeft een rechte:
tR,(n+1) = tR,(n).A - (A-1).tM
Bereken uit helling en intercept tM.
Deze laatste methode is de meest nauwkeurige, maar bedenk wel dat tM ook functie is van de samenstelling van de mobiele fase. Er bestaat dus niet één, definitieve waarde van tM
-
- Berichten: 6
Re: Dode volume van HPLC
Hallo,
Techniek 4 heb ik al eens uitgevooerd en werkt uitstekend.
je kan zo je systemen/onderdelen goed clasificeren.
Je kan dan ook nog eens je pieken gaan simuleren aan de hand van deze lijn en een minimum aan dood volume eis stellen voor een bepaalde resolutie.
groeten,
Sjoerd
Techniek 4 heb ik al eens uitgevooerd en werkt uitstekend.
je kan zo je systemen/onderdelen goed clasificeren.
Je kan dan ook nog eens je pieken gaan simuleren aan de hand van deze lijn en een minimum aan dood volume eis stellen voor een bepaalde resolutie.
groeten,
Sjoerd
