Hallo allen,
Ik heb de volgende vraag:
bij het gebruiken van een vaste fase assay voor antilichamen ga je een plaat coaten met een antigeen dan staat er dat men het vrije antigeen zal wegwassen en daarachter staat bijgeschreven tussen haakjes dat men de plaat blokeert met een overmaat irrelevant eiwit om te voorkomen dat tijdens het vervolg niet specifieke binding van eiwitten optreedt. (is dit dan de manier om die overmaat weg te wassen?)
Maar dit snap ik toch niet, als je irrelevant eiwit gaat laten binden op je antigenen die geadsorbeerd zijn op je plaat en de vrije antigenen (het niet geadsorbeerde dus vrije antigeen) dan kan later het antilichaam er toch nietmeer op binden?
Of ga je tijdens het wassen al dat eiwit wegwassen dat gebonden is op die vrije antigenen + al het eiwit dat gebonden was op de antigenen die op je plaat geadsorbeerd zijn (met andere woorden je gaat die eiwitten terug van die antigenen halen die op die plaat zitten en daar blijven zitten?)
Laatste berichten
-
23:25
2013 – Augustus Vraag 3
-
23:07
Rood laserlicht 2
-
23:04
Bruine vlekken op treinaanwijzerbord 5
-
15:28
Vraag 2009 Juli Vraag 5 5
-
12:51
positie 2
-
10:44
Schroefdraad berekening 8
-
24 apr
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 9
-
23 apr
Weerfrustratie 9
-
23 apr
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 15
-
23 apr
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
23 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
23 apr
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
23 apr
projectiel 8
-
23 apr
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
23 apr
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
22 apr
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
22 apr
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
immuno assay
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 740
Re: immuno assay
Even kort:
Je laat je antigenen binden, dit doe je in een buffer met een sterke oppervlakte spanning zodat de eiwitten tegen de randen "geduwd".
Vervolgens was je alle niet gebonden antigenen weg met de wasstap. Vervolgens blokkeer je de nog overgebleven stukken, waar geen antigeen gebonden is met bijvoorbeeld gelatine of BSA. Doe je dit niet, dan kunnen hier alle antilichamen uit de volgende stap binden, dus ook mogelijk antilichamen niet specifiek zijn (oftewel degene die je niet wilt meten).
Hiermee voorkom je dus vals positieve uitslagen en wordt de sensitiviteit van de test een stuk hoger.
Je laat je antigenen binden, dit doe je in een buffer met een sterke oppervlakte spanning zodat de eiwitten tegen de randen "geduwd".
Vervolgens was je alle niet gebonden antigenen weg met de wasstap. Vervolgens blokkeer je de nog overgebleven stukken, waar geen antigeen gebonden is met bijvoorbeeld gelatine of BSA. Doe je dit niet, dan kunnen hier alle antilichamen uit de volgende stap binden, dus ook mogelijk antilichamen niet specifiek zijn (oftewel degene die je niet wilt meten).
Hiermee voorkom je dus vals positieve uitslagen en wordt de sensitiviteit van de test een stuk hoger.
-
- Berichten: 254
Re: immuno assay
ok
dank u wel voor uw antwoord.
Nu begrijp ik het, je gaat de irrelevante eiwitten doen binden op de stukken plaat waar geen antigenen opzitten.
Je gaat niet de antigenen doen binden met het irrelevantie eiwit..
het stond niet zo duidelijk in de cursus.
Ik dacht dat je de antigenen ging doen binden met het irrelevante eiwit.. wat natuurlijk niet logisch lijkt.
Toch nog de volgende vraag: gaat die gelatine of BSA niet binden met die antigenen?
dank u wel voor uw antwoord.
Nu begrijp ik het, je gaat de irrelevante eiwitten doen binden op de stukken plaat waar geen antigenen opzitten.
Je gaat niet de antigenen doen binden met het irrelevantie eiwit..
het stond niet zo duidelijk in de cursus.
Ik dacht dat je de antigenen ging doen binden met het irrelevante eiwit.. wat natuurlijk niet logisch lijkt.
Toch nog de volgende vraag: gaat die gelatine of BSA niet binden met die antigenen?
-
- Berichten: 740
Re: immuno assay
Nee, deze hebben geen bindingsaffiniteit voor elkaar en zullen dus normaal gesproken niet binden.
De antigeen-antilichaam interactie is daarentegen weer zeer sterk, waardoor deze dus wel zal binden.
De antigeen-antilichaam interactie is daarentegen weer zeer sterk, waardoor deze dus wel zal binden.
