Kwiknitraat is idd wat overdreven, met zilvernitraat was dat toch ook gegaan? En dan met kaliumdichromaat als indicator. Probleem is dan natuurlijk de kleur van urine. Zou dat te ontkleuren zijn met actieve kool zonder dat je het chloor ervandoor gaat?
Volgens mij kan het wel met Chloorvrije actieve kool, dat stond namelijk ook ergens bij die proef die ik als eerste zou gaan doen.
Dit is de proef zoals ik hem in de eerste instantie heb uitgewerkt:
Bepaling van chloride in urine
Inleiding
De hoeveelheid Cl- is afhankelijk van de terugname van Na+ in de nieren. Het Cl- wordt niet actief geresorbeerd, maar stroomt samen met het water passief mee bij het actieve transport van Na+. Zodoende is het chloridegehalte meetbaar in de urine.
Deze proef wordt in 3 stappen uitgevoerd (A, B en C): om te beginnen wordt de titer van Hg(NO3)2 vastgesteld, dan het blancoverbruik en tenslotte het indicatorverbruik in de urine. De titer is een maat voor de concentratie van de deeltjes die bij de reactie met elkaar reageren.
De bepaling vindt plaats via een titratie met kwiknitraat, Hg(NO3)2, waarin de Hg2+ en de Cl- een onoplosbare verbinding vormen. Als alle Cl- is "opgereageerd", zal verder toegevoegde Hg2+ vrij blijven en dan met de indicator DFC (=difenylcarbazon) een violette kleur geven. Reactievergelijkingen:
Hg2+ + 2 Cl- → HgCl2↓
Als alle Cl- op is: Hg2+ + DFC geeft een violet Hg2+-DFC-complex
De doelstelling is dus het bepalen van de hoeveelheid chloride-ionen in verse urine. We doen dit als volgt:
A. De titerstelling van Hg(NO3)2
Benodigheden
20% TCA (trichloorazijnzuur): los 20 gr TCA op, vul aan tot 100 ml.
DFC-indicator: los 20 mg difenylcarbazon op in 2 ml 96% ethanol. Breng over in een bruin druppelflesje. Dit moet liefst vers gebeuren.
Hg(NO3)2-oplossing van ongeveer 0,015 M Hg(NO3)2. Los 3,25 gram HgO (molgewicht: 216,59 g/L) op in 10 ml 65% salpeterzuur (HNO3) (chloride-vrij) en vul aan met water tot 1 liter, in een maatkolf.
NaCl-standaardoplossing: droog NaCl (molgewicht: 58,44 g/L) tot constant gewicht door verhitting op 300 °C. Los 1,752 gram op in een maatkolf van 1000 ml. en vul aan. De titer is dan 0,03 mol per liter.
Indien mogelijk kan de TOA tevoren de hierboven genoemde oplossingen maken
aquadest
buret (schoon en droog)
2 erlenmeyer"s 50ml
tekenpapier
5ml pipet.
Werkwijze
(1) Pipetteer nauwkeurig 4 ml 0.03M NaCl in een erlenmeyer van 50 ml. Voeg 2 ml TCA-oplossing (20%) toe en 2 druppels DFC-indicator.
(2) Vul een schone droge buret met de Hg(NO3)2. Noteer de beginstand.
(3) Voeg snel 3 ml Hg(NO3)2 onder zwenken toe aan de Erlenmeyer met NaCl oplossing.
(4) Leg een vel wit papier onder de erlenmeyer en voeg nu druppelsgewijs Hg(NO3)2 toe, tot de oplossing juist roze is. Noteer de eindstand, bereken het verbruik (V).
Herhaal de bepaling 2x en bereken het gemiddelde gebruik (V).
Toelichting: 4 ml 0.03 M NaCl wordt verdund tot een 0.02 M oplossing door toevoeging van 2 ml TCA. De Hg(NO3)2 oplossing in de buret heeft een geschatte titer van 0.015 M. Voor het precipiteren van 6 ml 0.02 M NaCl is ca. 3 ml van 0.02 M Hg(NO3)2 nodig, omdat 1 Hg2+ 2 Cl- ionen kan binden. Derhalve kan veilig 3 ml van ca. 0.015 M Hg(NO3)2 in één keer worden toegevoegd voordat met druppelsgewijs titreren wordt begonnen. Het geschatte verbruik V zal dus liggen rond de 4 ml 0.015M Hg(NO3)2 ( V≈ 3 x 0.020/0.015).
B. De blancobepaling
Herhaal nu deze stappen maar vervang hierbij de NaCl door aquadest.
! Let op: begin hierbij meteen met druppelen, dus niet eerst door laten lopen.
Bereken het blancoverbruik (Vb).
Titerstelling
Met onderstaande formule kun je nu de titer van Hg(NO3)2 berekenen uit:
4 x titer NaCl gedeeld door (V- Vb) = titer Hg(NO3)2
Toelichting: Stel dat voor de blanco titratie ca. 0.1 ml nodig is, dan is V-Vb geschat
3.9 ml. Bij het omslagpunt is het product van volume en de molariteit (titer) van de hoeveelheid bekende (4 x 0.02) gelijk aan het product en de (onbekende molariteit) van het toegevoegde volume (min de blanco) van de titratie vloiestof:
4 x 0.02 = (V-Vb) x molariteit Hg(NO3)2 , oftewel titer Hg(NO3)2 = 4 x 0.02 / (V-Vb)
Uitgaande van 4 en 0.1 ml wordt dat dus 4 x 0.02 / (4-0.1) = 0.02
C. De bepaling van Cl- in urine
Voer de onderstaande bepaling nu uit met verse urine.
Benodigheden
10ml pipet
50ml Erlenmeyer
aquadest
verse urine
TCA
een mespuntje absorberende koolstof
2 druppels verse DFC (zie hierboven)
tekenpapier
trechtertje + filtreerpapier.
Werkwijze
(1) Pipetteer in een erlenmeyer van 50 ml achtereenvolgens 20 ml water, 4 ml urine en 10 ml TCA (20%)
! Bij sterk gekleurde urine een mespuntje chloride-vrije absorberende koolstof toe voegen en 10 minuten laten staan en filtreren.
(2) Vul de buret met Hg(NO3)2, noteer de beginstand.
(3) Pipetteer in een schone erlenmeyer van 50 ml nauwkeurig 5 ml urinemengsel (filtraat), en voeg 2 druppels DFC-indicator toe.
(4) Voeg snel uit de buret 2 ml Hg(NO3)2 toe, sluit de kraan, leg onder de erlenmeyer wit papier.
(5) Voeg onder zwenken van de erlenmeyer druppelsgewijs Hg(NO3)2 toe tot de oplossing juist roze is. Lees de eindstand af en bereken het verbruikte volume V.
Herhaal deze bepaling nog 2x en bereken uit deze 3 waarden de gemiddelde V.
Bijbehorende blancobepaling
(1) pipetteer in een 50 ml erlemeyer, 24 ml water en 10 ml 20% TCA
! indien koolstof is gebruikt, voeg dan ook nu een mespuntje toe, laat 10 minuten staan en filtreer.
(2) Vul de buret met Hg(NO3)2, noteer de beginstand.
(3) Pipetteer in een schone 50 ml erlenmeyer 5 ml blancomengsel (filtraat), en voeg 2 druppels DFC-indicator toe.Leg onder de erlenmeyer wit papier.
(4) Voeg onder zwenken van de erlenmeyer druppelsgewijs Hg(NO3)2 toe tot de oplossing juist roze is. Lees de eindstand af en bereken het blancoverbruik Vb.
Toelichting: 4 ml urine wordt verdund tot 34 ml. Hiervan wordt 5 ml voor de titratie gebruikt. Dat komt dus overeen met 5 x 4/34 ml urine. Van de titratievloeistof wordt tot de kleuromslag (V-Vb) gebruikt met een molariteit die hierboven bepaald is. Dan geldt dus:
5 x (4/34) x NaCl titer urine = (V-Vb) x molariteit van Hg(NO3)2
Dus 5 x (4/34) x (gram NaCl/58.44) = (V-Vb) x molariteit Hg(NO3)2
Dus: gram NaCl = (V-Vb)/5 x molariteit Hg(NO3)2 x (34/4) x 58.44
Dus: gram NaCl = (V-Vb) x molariteit Hg(NO3)2 x 99.3
Gehalte berekening
Met onderstaande formule kan de hoeveelheid NaCl in de urine berekend worden:
99.3 x ( V - Vb) x titer Hg(NO3)2 = gram NaCl/L
Om tot gram per liter Cl- ionen te komen moet dan nog vermenigvuldigd met 35.453/58.44. Dit is dus om rekening te houden met het aandeel van Cl in NaCl.
Dus: (35.453/58.44) x 99.3 x ( V - Vb) x titer Hg(NO3)2 = gram Cl-/L
dus als ik in de bovenstaand beschreven proef kwiknitraat vervang door zilvernitraat en kaliumdichromaat als indicator gebruik in plaats van difenylcarbazon?
.
.
