Hoi,
Het volgende probleem:
Ik ben bezig met een western blot. Na een nacht incuberen met serum heb ik de volgende dag de blot ingezet met anti-humaan-rabbit-antilichaam. Wat nu blijkt is dat de tweede stap goat-anti-rabbit-antilichaam (Enzym) niet aanwezig is.
We hebben onze blots maar op TBS-T(wasbuffer) gezet en laten dit in de koeling staan tot het substraat weer aanwezig is.
Vraag:
Heeft dit invloed op de kleuring van mijn blot? Er zitten schimmeleiwitten op die al niet zo sterk kleuren.
Blijft het anti-hum.-rabbit al die tijd zitten, of is het beter om deze stap later te herhalen?
Raad iemand een andere opslagmethode aan?
Alvast bedankt.
Laatste berichten
-
14:16
do-re-mi-fa-so vliegtuigen 7
-
14:16
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 3
-
13:57
De Euro Nederlandse 100 qubit computer komt eraan
-
11:32
[scheikunde] Kan chloorgas de geleiding van elektriciteit belemmeren? 6
-
11:31
geen minkowski-ruimte toch? Doe ik dit nou fout? 14
-
10:42
projectiel 8
-
10:37
Verschil tussen deze 2 vragen 5
-
09:48
Schroefdraad berekening 4
-
09:25
[scheikunde] berekeningen labo vitamine c bepaling 1
-
19:29
[wiskunde] rode en witte ballen verdelen 8
-
17:23
Rotatie van het heelal 41
-
22 apr
Weerfrustratie 5
-
22 apr
Muntje opgooien 14
-
21 apr
Reactiviteit silyl enol ethers 1
-
21 apr
Criterium voor vochtretentie
-
21 apr
speciale rel. theorie 5
-
21 apr
Vogels in de stad zijn goede klussers
-
21 apr
Ervaringen met "herontdekkingen" 15
-
20 apr
Herleiden afmetingen vanaf een foto 19
-
20 apr
Stank rotte eieren uit de warmwaterboiler 11
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Western blot kleuring
Moderator: ArcherBarry
Re: Western blot kleuring
Op zich lijkt me het in PBST wegzetten in de koelkast geen probleem hangt een beetje vanaf hoelang.
Als het langer duurt zou ik de PBST vervangen door PBST met azide of thiomersal om bederf tegen te gaan.
Iets anders is om de blot gewoon aan de lucht te drogen, ik heb geen ervaring met al met antiserum geincubeerde blots, maar alleen geblotte stroken drogen aan de lucht gaat goed en ze blijven in ieder geval weken goed is mijn ervaring.
Als het langer duurt zou ik de PBST vervangen door PBST met azide of thiomersal om bederf tegen te gaan.
Iets anders is om de blot gewoon aan de lucht te drogen, ik heb geen ervaring met al met antiserum geincubeerde blots, maar alleen geblotte stroken drogen aan de lucht gaat goed en ze blijven in ieder geval weken goed is mijn ervaring.
-
- Berichten: 16
Re: Western blot kleuring
De opslagmethode was prima voor een week. Het enzym was binnen gekomen en de blotjes kleurden prima.
