T4 polymerase werking

Moderator: ArcherBarry

Reageer
Berichten: 32

T4 polymerase werking

hallo,

Ik heb een vraag over de werking van het T4 polymerase.

Ik heb gelezen dat het een exonuclease activiteit heeft afhankelijk van het aantal aanwezig dNTP's , maar wat bedoelt men hiermee?

Zal T4 in plaats van dNTP's toe te voegen er dan verwijderen?



5' TGGGGAA 3'

3' ACCCCTT TTAAGGCC 5'

als je dit hebt, en er zitten bv. weinig dTNP's in je potje zal T4 dan enkel een A aanzetten en dan stoppen en dan die aangezetten A terug gaan verwijderen?

Of ?

Berichten: 740

Re: T4 polymerase werking

In het geval van een 5' overhang zal de polymerase er nucleotiden aanzetten, dit is dus het geval van jou voorbeeld.

Heb je een 3' overhang, dan zal de polymerase de overhang eraf halen met de nuclease activiteit.

Berichten: 32

Re: T4 polymerase werking

En dit heeft dus niets te maken met de hoeveelheid dntps dat je toevoegt?

Dus als er weinig dntps zijn dan nog zal het T4 polymerase verder dntps inbouwen?

Berichten: 740

Re: T4 polymerase werking

Weinig dNTPs zorgen er alleen voor dat de enzymatische reactie trager verloopt. De activiteit veranderd verder niet.

Als je geen dNTP's toevoegd, dan loopt de reactie en gebeurd er ook niks.

Reageer