DNA loading buffer
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 83
DNA loading buffer
dames en heren,
hier een simpele vraag.
wat is het verschil tussen 3x en 6x loading buffer?
waar gebruik je welke voor??
greets,
Jaffaa
hier een simpele vraag.
wat is het verschil tussen 3x en 6x loading buffer?
waar gebruik je welke voor??
greets,
Jaffaa
-
- Berichten: 87
Re: DNA loading buffer
Het verschil zit hem in de concentratie van de loading buffer, en dus in de verdunning die je moet hanteren wanneer je een DNA monster op een agarose gel laadt. Voor een 6x loading buffer meng je 5 volumes DNA monster met 1 volume loading buffer, en voor een 3x loading buffer meng je 2 volumes DNA monster met 1 volume loading buffer.
Afhankelijk van de grootte van het DNA molecuul dat op de gel wordt geladen worden verschillende soorten kleuringen in de loading buffers gebruikt. Dit wordt zo gekozen zodat de kleur in de loading buffer een referentie is voor de afstand die jouw DNA molecuul ongeveer in de gel is gemigreerd. Kijk na welke kleuring aanwezig is in beide loading buffers en welke van de twee het meest geschikt is om te laden voor een DNA molecuul van jouw grootte. Als jouw 3x en 6x loading buffer dezelfde kleuring bevatten maakt het niet uit welke van de twee je gebruikt. Zorg wel altijd dat je tussen de 40ng en 100ng DNA op de gel laadt, omdat de bandjes anders goed zichtbaar zijn, of te dik worden.
Afhankelijk van de grootte van het DNA molecuul dat op de gel wordt geladen worden verschillende soorten kleuringen in de loading buffers gebruikt. Dit wordt zo gekozen zodat de kleur in de loading buffer een referentie is voor de afstand die jouw DNA molecuul ongeveer in de gel is gemigreerd. Kijk na welke kleuring aanwezig is in beide loading buffers en welke van de twee het meest geschikt is om te laden voor een DNA molecuul van jouw grootte. Als jouw 3x en 6x loading buffer dezelfde kleuring bevatten maakt het niet uit welke van de twee je gebruikt. Zorg wel altijd dat je tussen de 40ng en 100ng DNA op de gel laadt, omdat de bandjes anders goed zichtbaar zijn, of te dik worden.