Ik heb een aantal ELISA's uitgevoerd tbv cytokines in serum. De volgende stappen zijn gedaan:
1. coating met specifieke ab
2. blocking met BSA
3. stalen opgebracht: standaardreeks en de serumstalen onverdund en 1/2 verdund met PBST-B. Tevens is er een blanco
4. Specifieke ab toegevoegd
5. SPP cinjugaat
6. TMB oplossing
Tussen iedere stap is er 6x gewassen met PBST (muv na het blokken).
De standaardreeks ziet er heel goed uit: r2=0,998 Normaliter trek je de blanco van alle resultaten af. En daar zit nu het probleem. De blanco is ongeveer 0,1. De hoogste standaard zit rond de 0,8-1,4. Indien ik van alle resultaten de blanco aftrek, dan zijn de uiteindelijke berekende concentraties van de onverdunde en de verdunde stalen totaal verschillend. Indien ik de blanco NIET aftrek van de onverdunde stalen dan komen de concentraties wel redelijk met elkaar overeen.
Mijn vraag is: kan het zijn dat de BSA die in de PBST-B zit voor een hogere blanco heeft gezorgd, waardoor het inderdaad kan kloppen dat je de blanco niet van de onverdunde stalen (die hadden nl geen PBST-B) moet aftrekken, of is er een andere oorzaak voor dit probleem?
Ik hoop dat iemand mij hiermee kan helpen....
Bella
Laatste berichten
-
06:56
Casus uit de praktijk: positief test THC 3
-
22:01
vB 7
-
21:45
Vreemde stank in huis 9
-
15 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 1
-
15 apr
Python: sockets sluiten 4
-
14 apr
Een eenvoudige logische redenering waarom tijd niet kan bestaan 'daarbuiten' 6
-
14 apr
Hoe kun je op quantumwijze getallen vinden in een rij die kleiner zijn dan getal k 3
-
13 apr
Rotatie van het heelal 22
-
13 apr
Documentenverdwijnen uit onedrive 1
-
12 apr
Behoud van impulsmoment en energie 5
-
12 apr
INLOG STORING / TIPS 4
-
09 apr
[natuurkunde] systeemgrafen 1
-
05 apr
afbuiging licht rond zware objecten via grondbeginselen relativiteitstheorie 490
-
05 apr
Ongepaste reclame 179
-
04 apr
Gegevens wissen mobiel 6
-
04 apr
Geiger Muller telbuis 2
-
03 apr
Schroefdraad berekening 3
-
03 apr
Relatieve luchtvochtigheid 26
-
03 apr
tank 4
-
02 apr
gereduceerde massa 12
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Immunologie: probleem met ELISA
Moderator: ArcherBarry
Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
Re: Immunologie: probleem met ELISA
Ik kan het zo niet zien, de PBST/BSA kan een probleem geven bij de binding maar erg waarschijnlijk is het niet.
Kun je de ruwe data eens geven misschien dat ik je dan verder kan helpen.
Kun je de ruwe data eens geven misschien dat ik je dan verder kan helpen.
-
- Berichten: 27
Re: Immunologie: probleem met ELISA
hoelang heb je tussen de stappen door geincubeerd en bij hoeveel graden hier kan zich ook nog een probleem vormen te hoog kan het zijn dat ab's kapot gaan.
