Wetenschapsforum

Hallo, ik stuit op een probleem tijdens de uitwerking van een practicum.

Ik heb gewerkt met een GC waarmee ik vetzuren heb gescheiden.

Ik heb gebruik gemaakt van twee standaarden die de vetzuren C12, C14, C16, C18 bevatten. Onderstaande waarden heb ik verkregen via de GC.

Standaard (in methanol) - Chromatogram met 4 pieken.

Piek____________tR___________Log(tR)

Piek 1_________1,650_________0,217

Piek 2_________2,407_________0,381

Piek 3_________3,697_________0,568

Piek 4_________5,880_________0,769

Standaard (in heptaan) - Chromatogram met 4 pieken.

Piek____________tR___________Log(tR)

Piek 1_________1,657_________0,219

Piek 2_________2,413_________0,383

Piek 3_________3,703_________0,569

Piek 4_________5,893_________0,770

Log(tR) heb ik uitgezet tegen het aantal vetzuren.

Monster - Chromatogram met 4 pieken.

Piek____________tR___________Log(tR)

Piek 1_________1,657_________0,224

Piek 2_________2,407_________0,381

Piek 3_________3,687_________0,567

Piek 4_________4,633_________0,666

Ik heb bepaald dat het monster C12, C14, C16 en C17 bevat (Log(tR) ingevuld in standaardcurves).

Nu mijn problemen;

Probleem 1.) Bepaal op grond van de oppervlakten van de pieken de verhouding van de vetzuren (in%) in het monster.

Onderstaande waarden heb ik uit het chromatogram;

Piek_________Vetzuur____Oppervlakte(%)

Piek 1_________C12_________17,1

Piek 2_________C14_________25,9

Piek 3_________C16_________14,7

Piek 4_________C17_________27,3

Kan ik dan zeggen dat de verhouding van vetzuren is als volgt?

C12 : C14 : C16 : C17 = 17,1% : 25,9% : 14,7% : 27,3%

Probleem 2.) Bereken de juiste hoeveelheid van de vetzuren in mg in het monster. De uitslag in: mg per 100 ml oplosmiddel (methanol).

De standaarden bevatten van elk vetzuur 100 mg op gelost in 100 ml methanol.

Is het dan zo dat ik de oppervlaktes van de pieken van het monster moet vergelijken met de oppervlakten van de pieken van de standaard (in methanol)?

Ik kom er eerlijk gezegd totaal niet uit.

Bij deze hoop ik dat iemand mij enigszins in de goede richting kan duwen.

Met vriendelijke groet,

Danny

Probleem 1.)

De totale som van de opgegeven percentages is niet 100 %. Ik vermoed dat het ontbrekende (15 %) de solventpiek is. Die moet je uiteraard niet meerekenen als je de relatieve concentraties van de verschillende vetzuren moet bepalen. Nu is het natuurlijk zo dat verschillende vetzuren een verschillende respons geven. Voor dit probleem neem je aan dat alle moleculen dezelfde respons geven.

Probleem 2.)

Hier hou je WEL rekenening met de verschillende respons. DWZ dat je per vetzuur de piekoppervlakte gaat delen door de juiste concentratie:

RF = Opp/Conc

Voor de onbekende reken je dan de concentratie terug door de piekoppervlakte te delen door de RF:

Conc = Opp/RF