Ik heb bij de verwerking van mijn resultaten voor mijn thesis een vraag. Ik maak gebruik van een extractiemethode en detectie met UPLC. Adhv de detectie weet ik hoeveel tocoferolen aanwezig zijn in mijn injectie (in µg/mL). Mijn injectie is een geëxtraheerd resultaat van mijn oorspronkelijk monster. Ook mijn kalibratiecurve werd opgemaakt in µg/mL. Nu zou ik te weten moeten komen hoeveel µg/g tocoferolen er in mijn monster zaten. Ik nam telkens 5g monster, afgewogen op een analytische weegschaal.
Met andere woorden, ik zou mijn geïnjecteerde concentratie in µg/mL (weet ik door detectie, chromatogrammen en regressievergelijking) moeten omrekenen in µg/g (zoals in literatuur weergegeven), wetende dat ik telkens 5g monster gebruikte. Voor mijn kalibratiecurve startte ik van een standaardoplossing van 1mg/mL en heb ik verschillende concentraties geïnjecteerd (0,5; 1; 2,5; 4; 5 en 7,5 µg/mL).
Kan iemand mij met deze vraag helpen?
Babette
Laatste berichten
-
00:49
Ervaringen met "herontdekkingen" 11
-
00:37
Rotatie van het heelal 24
-
21:28
hall effect in vloeistof gebruiken als stromingssensor 6
-
17:59
Gezocht: de/een naam voor een getallenrij met een cauchyrij als partieelsommenrij
-
17:28
Casus uit de praktijk: positief test THC 18
-
17 apr
speciale rel. theorie 4
-
17 apr
Vreemde stank in huis 11
-
17 apr
3 vragen over mijn rooskleurige r.berekening H2netGekoppeldeHBrflowbatterij.
-
17 apr
Interpretatie reactie-energie 3
-
17 apr
Logistic equation (Pierre Verhulst,Belgian Mathematician) 5
-
16 apr
vB 9
-
15 apr
Kunnen quantum Zonnecellen 190% quantum efficiënt zijn 1
-
15 apr
Python: sockets sluiten 4
-
14 apr
Een eenvoudige logische redenering waarom tijd niet kan bestaan 'daarbuiten' 6
-
14 apr
Hoe kun je op quantumwijze getallen vinden in een rij die kleiner zijn dan getal k 3
-
13 apr
Documentenverdwijnen uit onedrive 1
-
12 apr
Behoud van impulsmoment en energie 5
-
12 apr
INLOG STORING / TIPS 4
-
09 apr
[natuurkunde] systeemgrafen 1
-
05 apr
afbuiging licht rond zware objecten via grondbeginselen relativiteitstheorie 490
Nieuwsberichten
-
04 mar
Een nieuw soort magnetisme: altermagnetisme
-
31 okt
AI kan via stem diabetes vaststellen 11
-
21 okt
Einstein krijgt wéér gelijk 45
-
07 feb
witter dan wit 20
-
19 jun
irrigatie en de aardas
Bepaling van gehalte aan tocoferolen (vitamine E) in monsters adhv UPLC
Moderator: ArcherBarry
-
- Berichten: 5
Re: Bepaling van gehalte aan tocoferolen (vitamine E) in monsters adhv UPLC
Ik ben zelf ondertussen op een eventueel antwoord gekomen. Zou dit kunnen correct zijn?
Ik injecteerde een volume van 100 µL, waarin mijn geëxtraheerde tocoferolen opgelost waren. Als dit bv uitgerekend volgens de regressievergelijking 0,15 µg/mL tocoferolen bevatte, dan wil dit zeggen dat mijn geïnjecteerde oplossing een concentratie had van 0,015 µg tocoferolen per 100µL oplossing. Dit is het resultaat van 5g monster, dus in 1g monster zit 0,003 µg/g (0,015 gedeeld door 5).
Is dit een correcte denkwijze?
Babette
Ik injecteerde een volume van 100 µL, waarin mijn geëxtraheerde tocoferolen opgelost waren. Als dit bv uitgerekend volgens de regressievergelijking 0,15 µg/mL tocoferolen bevatte, dan wil dit zeggen dat mijn geïnjecteerde oplossing een concentratie had van 0,015 µg tocoferolen per 100µL oplossing. Dit is het resultaat van 5g monster, dus in 1g monster zit 0,003 µg/g (0,015 gedeeld door 5).
Is dit een correcte denkwijze?
Babette
-
- Berichten: 6.853
Re: Bepaling van gehalte aan tocoferolen (vitamine E) in monsters adhv UPLC
Ik kan je rekenwijze niet helemaal volgen. Zitten alle geëxtraheerde tocoferolen in die 100 microliter? Of heb je daar ook nog een monstertje genomen van het geheel?
Volgens mij kun je het best rekenen met hoeveelheden in plaats van concentraties. Hoeveel zat er in je ingespoten hoeveelheid? Reken dat terug naar je hele extract, je hele monster etc. Pas op het laatste moment reken je om naar een concentratie. Misschien nog een beter alternatief is om een ijkmeting te doen aan een bekend monster dat heel veel lijkt op je echte monster; dan neem je ook de extractie-efficiëntie in aanmerking.
Volgens mij kun je het best rekenen met hoeveelheden in plaats van concentraties. Hoeveel zat er in je ingespoten hoeveelheid? Reken dat terug naar je hele extract, je hele monster etc. Pas op het laatste moment reken je om naar een concentratie. Misschien nog een beter alternatief is om een ijkmeting te doen aan een bekend monster dat heel veel lijkt op je echte monster; dan neem je ook de extractie-efficiëntie in aanmerking.
-
- Berichten: 5
Re: Bepaling van gehalte aan tocoferolen (vitamine E) in monsters adhv UPLC
Het is eigelijk nog veel complexer dan dat achteraf gezien. Ik begrijp echt niet meer hoe ik mijn gehalte dat ik bekom in µg/mL (dat volgt uit de regressievergelijking van mijn kalibratiecurve) omzet naar een gehalte vanuit mijn monster.
Ik nam 5g monster en voegde hierbij in totaal 5 mL extractiesolvent (2,5 mL ethylacetaat + 2,5 mL n-hexaan). Dit werd geschud en gecentrifugeerd. Van het supernatans nam ik 1,5 mL dat ik in mijn clean-up tube deed (waar bepaalde zouten in aanwezig waren). Dit werd nog eens geschud en gecentrifugeerd. Van dit supernatans nam ik 700 µL, filtreerde dit en droogde dit met stikstof. Op deze droge massa deed ik 100 µL mobiele fase. Het geheel werd gevortext en werd geïnjecteerd in de UPLC.
Mijn resultaat dat uit het chromatogram kwam, de piekoppervlakte dus, zette ik om via de regressievergelijking van de kalibratiecurve in µg/mL. Ik begrijp dat dit het gehalte/concentratie aan tocoferolen van de geïnjecteerde oplossing (100 µL mobiele fase met opgeloste tocoferolen). Maar hoe ik nu rekening moet houden met de verdunningen (1,5 mL en 700 µL) en het geheel kan omzetten naar mijn 5g monster is me niet meer duidelijk.
Alvast bedankt voor je antwoord.
Ik nam 5g monster en voegde hierbij in totaal 5 mL extractiesolvent (2,5 mL ethylacetaat + 2,5 mL n-hexaan). Dit werd geschud en gecentrifugeerd. Van het supernatans nam ik 1,5 mL dat ik in mijn clean-up tube deed (waar bepaalde zouten in aanwezig waren). Dit werd nog eens geschud en gecentrifugeerd. Van dit supernatans nam ik 700 µL, filtreerde dit en droogde dit met stikstof. Op deze droge massa deed ik 100 µL mobiele fase. Het geheel werd gevortext en werd geïnjecteerd in de UPLC.
Mijn resultaat dat uit het chromatogram kwam, de piekoppervlakte dus, zette ik om via de regressievergelijking van de kalibratiecurve in µg/mL. Ik begrijp dat dit het gehalte/concentratie aan tocoferolen van de geïnjecteerde oplossing (100 µL mobiele fase met opgeloste tocoferolen). Maar hoe ik nu rekening moet houden met de verdunningen (1,5 mL en 700 µL) en het geheel kan omzetten naar mijn 5g monster is me niet meer duidelijk.
Alvast bedankt voor je antwoord.
-
- Berichten: 6.853
Re: Bepaling van gehalte aan tocoferolen (vitamine E) in monsters adhv UPLC
Elke keer als je maar een deel van je monster overneemt moet je eens uitrekenen welk deel dat is. Als je in een tiende deel van je monster 10 microgram hebt gevonden kun je zo terugrekenen hoeveel er in het geheel zit. Dit moet je voor alle stappen van achter naar voor doen.
