[scheikunde] concentratie bepalen via spectrofotometrie
Moderators: ArcherBarry, Fuzzwood
-
- Berichten: 9
concentratie bepalen via spectrofotometrie
Ik moet op mijn stage plaats van een oplossing de concentratie bepalen via spectrofotometrie.
methyl rood is de stof, maar ik moet van methyl geel de concentratie bepalen
ik neem aan dat ik iets moet toevoegen aan methyl rood ( buffer ? )
hoe doe ik dit ?
als ik de oplossing heb kan ik de concentratie bepalen via:
* absorptiespectrum( bij golflengte x is de extinctie ( E ) het hoogst.).
* spectrofotometer instellen op golflengte x
* verdunningsreeks maken=> hoeveel moet ik deze verdunnen ?
* ijklijn maken ( extinctie t.o.v concentratie )
* in de grafiek, d.m.v excel extinctie coëfficiënt bepalen d.m.v liniare regressie
* bepaal concentratie via wet van Lambert-beer
Ben ik in de goede richting aan het denken of is dit volledig onzin.
methyl rood is de stof, maar ik moet van methyl geel de concentratie bepalen
ik neem aan dat ik iets moet toevoegen aan methyl rood ( buffer ? )
hoe doe ik dit ?
als ik de oplossing heb kan ik de concentratie bepalen via:
* absorptiespectrum( bij golflengte x is de extinctie ( E ) het hoogst.).
* spectrofotometer instellen op golflengte x
* verdunningsreeks maken=> hoeveel moet ik deze verdunnen ?
* ijklijn maken ( extinctie t.o.v concentratie )
* in de grafiek, d.m.v excel extinctie coëfficiënt bepalen d.m.v liniare regressie
* bepaal concentratie via wet van Lambert-beer
Ben ik in de goede richting aan het denken of is dit volledig onzin.
-
- Berichten: 772
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
Je bent op de goede weg. Methylrood kleurt geel bij een pH waarde groter dan 6.2 dus je zult allesinds moeten bufferen. Gebruik bvb een fosfaat buffer op pH = 7.0.
Daarna dien je inderdaad het absorptiespectrum te gaan opmeten. Selecteer hieruit het absorptiemaximum en voer verdere metingen uit op dit punt. Best een relatief hoge concentratie aan methylgeel gebruiken.
Vervolgens kun je een verdunningsreeks gaan opmaken. Welke verdunningen je dient aan te maken is op voorhand wat moeilijk te voorspellen. Over het algemeen zou ik geen concentraties gebruiken waarbij de absorbantie hoger is dan 1 a 1.2, aangezien dan afwijkingen in de wet van Lambert-Beer kunnen gaan optreden (maw absorbantie neemt niet meer lineair toe met de concentratie).
Daarna dien je inderdaad het absorptiespectrum te gaan opmeten. Selecteer hieruit het absorptiemaximum en voer verdere metingen uit op dit punt. Best een relatief hoge concentratie aan methylgeel gebruiken.
Vervolgens kun je een verdunningsreeks gaan opmaken. Welke verdunningen je dient aan te maken is op voorhand wat moeilijk te voorspellen. Over het algemeen zou ik geen concentraties gebruiken waarbij de absorbantie hoger is dan 1 a 1.2, aangezien dan afwijkingen in de wet van Lambert-Beer kunnen gaan optreden (maw absorbantie neemt niet meer lineair toe met de concentratie).
-
- Berichten: 383
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
Als ik het goed begrepen heb; Je krijgt een onbekende oplossing en je gaat die titreren (met NaOH?). Je gaat methylrood als indicator gebruiken. Vanaf het omslagpunt, waar de indicator de oplossing geel maakt, breng je wat van die oplossing in de spectrofotometer (ook een blanco maken) en bereken je de concentratie. Heb ik dat goed?
-
- Berichten: 9
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
NW_ schreef: Je bent op de goede weg. Methylrood kleurt geel bij een pH waarde groter dan 6.2 dus je zult allesinds moeten bufferen. Gebruik bvb een fosfaat buffer op pH = 7.0. dus met andere woorden ik neem een oplossing met bv water en Methylrood en doe bij deze oplossing een fosfaat buffer( ph 7 ) en ja in welke hoeveelheden moet ik dan denken
Daarna dien je inderdaad het absorptiespectrum te gaan opmeten. Selecteer hieruit het absorptiemaximum en voer verdere metingen uit op dit punt. Best een relatief hoge concentratie aan methylgeel gebruiken.
Vervolgens kun je een verdunningsreeks gaan opmaken. Welke verdunningen je dient aan te maken is op voorhand wat moeilijk te voorspellen. Over het algemeen zou ik geen concentraties gebruiken waarbij de absorbantie hoger is dan 1 a 1.2, aangezien dan afwijkingen in de wet van Lambert-Beer kunnen gaan optreden (maw absorbantie neemt niet meer lineair toe met de concentratie).is dit een kwestie van een verdunningsreeks maken en meten en uitzetten in een ijklijn ( extinctie t.o.v concentratie ) ligt Extinctie hoger als 1=> meer verdunnen
-
- Berichten: 9
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
Daaf schreef: Als ik het goed begrepen heb; Je krijgt een onbekende oplossing en je gaat die titreren (met NaOH?). Je gaat methylrood als indicator gebruiken. Vanaf het omslagpunt, waar de indicator de oplossing geel maakt, breng je wat van die oplossing in de spectrofotometer (ook een blanco maken) en bereken je de concentratie. Heb ik dat goed?
yes
wat bedoel je met een blanco maken
-
- Berichten: 772
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
Het interessante aan onderzoek is dat je best een beetje creatief kunt zijn. Wat de concentratie van de buffer betreft: deze kun je vrij laag houden (de bufferende werking van fosfaatbuffers is vrij sterk: een 2.5 mM fosfaatbuffer kan in feite al vrij goed werken).
Een alternatief voor de methode doe ik voorstelde is het voorstel van Daaf (maw NaOH toevoegen: een 0.1 M NaOH zal waarschijnlijk al goede resultaten opleveren). Dit is trouwens een vrij klassiek experimentje voor studenten uit een labo-opleiding. De concentratie en het volume van de buffer/NaOH is minder van belang. Het gaat erom om de oplossing boven het omslagpunt rood-geel te krijgen.
Hou er wel rekening mee dat je in beide methodes gaat verdunnen door het toevoegen van deze stoffen, en dat je deze verdunningsfactor in rekening dient te brengen wanneer je de concentratie gaat bepalen.
Een alternatief voor de methode doe ik voorstelde is het voorstel van Daaf (maw NaOH toevoegen: een 0.1 M NaOH zal waarschijnlijk al goede resultaten opleveren). Dit is trouwens een vrij klassiek experimentje voor studenten uit een labo-opleiding. De concentratie en het volume van de buffer/NaOH is minder van belang. Het gaat erom om de oplossing boven het omslagpunt rood-geel te krijgen.
Hou er wel rekening mee dat je in beide methodes gaat verdunnen door het toevoegen van deze stoffen, en dat je deze verdunningsfactor in rekening dient te brengen wanneer je de concentratie gaat bepalen.
-
- Berichten: 383
Re: concentratie bepalen via spectrofotometrie
blitz10 schreef:
yes
wat bedoel je met een blanco maken
De blanco is het oplosmiddel, dus als je b.v. iets hebt opgelost in (gedistilleerd) water, dan is de blanco gewoon dat water en noemt I0 (dit gebruik je in de formule van Lambert-Beer).