Springen naar inhoud

collageen bepaling


  • Log in om te kunnen reageren

#1

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 12 oktober 2010 - 09:56

hoi mensen,

ik had weer een vraag in verband met collageen.
ik ben nu de collageen gehalte bepaling aan het uitwerken.

ik heb het voorschrift bij me en het is eigenlijk een hydroxyproline bepaling maar deze geeft een maat voor het collageen gehalte.

nu is alleen het probleem dat ik er in het begin al niet uit kom.
het afgewogen monster wordt in een tinchloride oplossing gedaan.
de oplossing bestaat uit tincloride en zoutzuur.
deze wordt vervolgens 16 uur gekookt bij 120C onder terugvloeikoeling.

maar ik weet dus niet waarom er voor deze oplossing is gekozen.

dus wat is de reactievergelijking.
en waarom deze oplossing.

alvast bedankt,

groetjes dennis

Dit forum kan gratis blijven vanwege banners als deze. Door te registeren zal de onderstaande banner overigens verdwijnen.

#2

ajonker

    ajonker


  • >250 berichten
  • 306 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 12 oktober 2010 - 11:46

1. Wat gebeurt er met de hydroxygroep van hydroxyproline als je er een chloride in de oplossing doet?

2. Wat voor redoxreactie (met o.a. tin) zal er gaan plaatsvinden?

Nu kun je denk ik zelf wel de reactievergelijking opstellen!

#3

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 oktober 2010 - 08:44

1. Wat gebeurt er met de hydroxygroep van hydroxyproline als je er een chloride in de oplossing doet?

2. Wat voor redoxreactie (met o.a. tin) zal er gaan plaatsvinden?

Nu kun je denk ik zelf wel de reactievergelijking opstellen!

sorry maar ik ben echt heel erg slecht in het maken van reactievergelijkingen. :oops:

Heb er overna gedacht maar kom er echt niet aan uit.

in ieder geval al bedankt voor de tip ;)

#4

ajonker

    ajonker


  • >250 berichten
  • 306 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 13 oktober 2010 - 09:42

Bekijk anders deze pdf eens! Daar staat de redoxreactie met natriummetaperjodaat als oxidator i.p.v. tin!

www.jbc.org/content/170/1/301.full.pdf

#5

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 27 oktober 2010 - 12:59

het wil nog niet lukken.
ik heb nu een reactie vergelijking maar weet niet eens of die goed is.
ook heb ik de andere vergelijkingen nodig kan iemand me de vergelijkingen geven.

de reactie zijn van deze bepaling

Hydrolyseren:
Weeg monster af circa 10 gram in een buis.
Voeg 30 ml tinchloride en kooksteentjes toe.
Verwarm de oplossing voor 16 uur bij 120°C.
Laat de buizen 10 min koelen.
Breng kwantitatief over in een maatkolf van 250 ml met heet demi.
Filtreer de oplossing over een vouwfilter.

Spectrometrie:
Pipetteer 0.1 ml van het monster, standaarden en blanco in een cuvet. (blanco is demi)
Pipetteer 1.9 ml oxidatie reagens in elke cuvet.
Laat de oplossing 20 min staan voor oxidatie.
Voeg overal 0.66 ml kleurreagens toe en meng.
Laat de oplossing 60 min staan.
Meet de cuvetten bij 546 nm.

Oplossingen:
De tinchloride oplossing bestaat uit:
• 140 ml geconcentreerd zoutzuur
• 50 ml water
• 10 gram tinchloride
Het kleurreagens bestaat uit:
• 2 gram 4-dimethylaminobenzaldehyde
• 7 ml perchloorzuur
• 13 ml iso-propanol
Het oxidatiereagens bestaat uit:
• 78 ml n-propanol
• 157 ml water
• 3,9 gram chlooramine-T
• 50 ml bufferoplossing
De citraat-acetaat buffer bestaat uit:
• 12.5 gram citroenzuur
• 3 ml azijnzuur
• 30 gram natriumacetaat
• 8.5 gram natriumhydroxide
• Aangevuld met demi in een 250 ml maatkolf

graag alle reactie vergelijkingen

alvast bedankt

#6

ceitwa

    ceitwa


  • >250 berichten
  • 365 berichten
  • Gebruiker

Geplaatst op 28 oktober 2010 - 13:36

wat mij hierin bevreemd is het kwantitatief overbrengen in een maatkolf met heet demi. daar zijn ze toch niet op gemaakt of heb je daar speciale maatkolven voor?

#7

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 01 november 2010 - 09:05

wat mij hierin bevreemd is het kwantitatief overbrengen in een maatkolf met heet demi. daar zijn ze toch niet op gemaakt of heb je daar speciale maatkolven voor?

nee hier gebruiken we gewoon normale maatkolven voor.
maar deze vullen we maar voor 3/4 en dan laten afkoelen.
dit omdat het vet uit de monsters dan stolt.
als je dan de maatkolf aanvult is het makkelijk omdat het vet onder als 1 groot stuk blijft zitten.
ook is het een probleem met naspoelen met demi met kamertemperatuur dat het vet uit de monster meteen stolt en krijg je dus nooit alles goed over.

maar weet je misschien wel de reactievergelijkingen?

groetjes dennis

#8

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 01 november 2010 - 10:32

ik weet nu het volgende.

water + tinchloride ==> Sn(OH)Cl + zoutzuur
collageen + ?? ==> (hydrolyse) hydroxyproline + ??
hydroxyproline + chlooramine T ==> (oxidatie) pyrrole + ??
pyrrole + aminobenzaldehyde ==> ??

kan iemand me vertellen welke structuren ik niet weer.
en of deze in het algemeen goed zijn.

alvast bedankt.

dennis

#9

Fuzzwood

    Fuzzwood


  • >5k berichten
  • 11101 berichten
  • Moderator

Geplaatst op 01 november 2010 - 10:56

wat mij hierin bevreemd is het kwantitatief overbrengen in een maatkolf met heet demi. daar zijn ze toch niet op gemaakt of heb je daar speciale maatkolven voor?

nee hier gebruiken we gewoon normale maatkolven voor.
maar deze vullen we maar voor 3/4 en dan laten afkoelen.
dit omdat het vet uit de monsters dan stolt.
als je dan de maatkolf aanvult is het makkelijk omdat het vet onder als 1 groot stuk blijft zitten.
ook is het een probleem met naspoelen met demi met kamertemperatuur dat het vet uit de monster meteen stolt en krijg je dus nooit alles goed over.

maar weet je misschien wel de reactievergelijkingen?

groetjes dennis

En op welke manier is dat nauwkeurig? Hoe kun je ooit een concentratie bepalen als een x volume al in beslag wordt genomen door een andere substantie dan je oplosmiddel?

#10

dennisr

    dennisr


  • >25 berichten
  • 26 berichten
  • Ervaren gebruiker

Geplaatst op 01 november 2010 - 11:09

het vet is afkomstig uit het monster dus dit moet worden meegenomen in het totaalvolume.

maar dit is nog steeds geen antwoordt op mijn vraagstelling
zou heel graag willen weten of ik in de goede richting zit en of iemand het wel exact weet.





0 gebruiker(s) lezen dit onderwerp

0 leden, 0 bezoekers, 0 anonieme gebruikers

Ook adverteren op onze website? Lees hier meer!

Gesponsorde vacatures

Vacatures