FISH-typering pre-implantatie genetische diagnostiek

Moderator: ArcherBarry

Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
Reageer

Bericht 14-12-'15, 21:54

Janne Snoeck

Gebruikersavatar
Berichten: 1

FISH-typering pre-implantatie genetische diagnostiek

Dag iedereen
 
Voor Labo Gentechnologie diende ik een protocol op te zoeken in het thema pre-implantatie genetische diagnostiek. Aangezien hiervoor FISH- typering gebruikt wordt, zocht ik een protocol met die techniek. Ik kwam uit op volgend protocol:
 
https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/mp32947.pdf
 
Nu heb ik gemerkt dat hier op lymfocyten getest wordt. Dit kan dus niet gebruikt worden bij pre-implantatie genetische diagnostiek. Ik vroeg me dus af hoe dit protocol moet aangepast worden zodat dit wel op embryo's getest kan worden.
 
Met vriendelijke groeten
 
Janne
Omhoog

Bericht 15-12-'15, 21:52

Jan van de Velde

Gebruikersavatar
Moderator
Berichten: 51.274

Re: FISH-typering pre-implantatie genetische diagnostiek

Opmerking moderator

Verplaatst naar het vakforum
ALS WIJ JE GEHOLPEN HEBBEN...
help ons dan eiwitten vouwen, en help mee ziekten als kanker en zo te bestrijden in de vrije tijd van je chip...
http://www.wetenscha...showtopic=59270
Omhoog

Bericht 04-01-'16, 17:43

Wouter_Masselink

Gebruikersavatar
Berichten: 8.559

Re: FISH-typering pre-implantatie genetische diagnostiek

Er is hier op pubmed genoeg over te vinden.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=preimplantation+FISH
 
Meer specifiek deze bijvoorbeeld
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26644858
The FISH process was performed in one hybridization round with the MultiVysion DNA Probe Panel (Vysis, Abbott Molecular Inc., Des Plaines, USA) for chromosomes 13 (LSI 13, SpectrumRed, 13q14), 16 (CEP 16 satellite II, SpectrumAqua, 16q11.2), 18 (CEP 18 alpha satellite, SpectrumBlue, 18p11.1-q11.1), 21 (LSI 21, SpectrumGreen, 21q11.2 – q22.2) and 22 (LSI 22, SpectrumGold, 22q11.2). The probes were denatured at a melting temperature of 69˚C for 8 minutes and hybridization was performed at 37˚C overnight. Next the hybridization coverslips were removed and the slides were washed for 7 minutes at 72˚C in 0.7×saline sodium citrate (SSC)/0.3% Nonidet® P-40 (NP-40: Abbott Molecular Inc., Des Plaines, USA, SSC, Invitrogen, life technologies, LifeTech Vienna, Austria) followed by a 1 minute incubation at room temperature in 2×SSC/0.1% NP-40. The slides were mounted with Antifade Solution without DAPI (Vector Laboratories, CA, USA) and fluorescence microscopy was performed using an Axioplan 2 microscope equipped with specific filters for each fluorochrome. In some cases, the split signals were problematic and usually correlated with bad blastomere morphology. The probe panel was tested on lymphocyte slides prepared by standard cytogenetic procedure, scoring for 25 metaphases and 100 interphases. The probe efficiency was 97% (Fig .1D).
 
Dit artikel geeft een relatief goed overzicht van het protocol dat is gebruikt. Dat heb ik wel eens anders gezien...
"Meep meep meep." Beaker
Omhoog
Reageer

Terug naar “Biologie en medisch laboratoriumonderzoek”