DNA isolatie met prepGEM - ervaring?

[Esther Dijkstra]

Hallo, 
 
Voor een project is het de bedoeling dat wij fraude in vlees aantonen aan de hand van DNA. 
Hiervoor moeten wij eerst het DNA uit het vlees isoleren. Hiervoor hebben wij een protocol aangeleverd gekregen die wij moeten gebruiken. 
Dit is het protocol van zygem: DNA Extraction Using prepGEM® Tissue. Het viel ons op dat dit protocol aanzienlijk korter is dan de normale protocollen die wij hebben gezien aangaande DNA isolatie. Wij vroegen ons dus af of iemand ervaring heeft met deze kit en ons kan vertellen wat deze kit precies doet met de bijbehorende reagentia. Wat gebeurt er precies per stap?
 
Protocol (in het engels): (is overigens op internet te vinden)
Extraction
 
1. Add:
89 µl DNA-free water.
10 µl of 10x Buffer 
1 µl prepGEM
 
2. Incubate:
75°C for [15 minutes for SOLID TISSUE] [5 minutes for TISSUE CULTURE] 
95°C for 5 minutes
 
A thermal cycler can be used for this step
 
3. For solid tissue, aspirate the extract away from residual material. The DNA is in this solution. Do not discard.
For long term storage of the extracted DNA, add TE buffer to 1x (10x Buffer is: 100 mM Tris, pH 7.5, 10 mM EDTA). Store at -20°C
 
 
Alvast bedankt.