hey,
Ik heb al op het internet gezocht, maar vond daar gene antwoord op mijn vraag.
Voor mijn thesis moet ik geglycosyleerde proteïnen kleuren. Dit doe ik met de GelCode Glycoprotein stain (pierce) en ik heb het protocol gevonden, maar ik weer niet waarom ik de verschillende stappen moet doen.
dit is het protocol:
1. After electrophoresis, fix gel by completely immersing it in 100 ml of 50% methanol for 30 minutes.
2. Wash gel by gently agitating with 100 ml of 3% acetic acid for 10 minutes. Repeat this step once.
Note: This can be a stopping point. The gel can be left in water overnight at 4°C.
3. Transfer gel to 25 ml of Oxidizing Solution and gently agitate for 15 minutes.
4. Wash gel by gently agitating with 100 ml of 3% acetic acid for 5 minutes. Repeat this step two additional times.
5. Transfer gel to 25 ml of GelCode® Glycoprotein Staining Reagent and gently agitate for 15 minutes.
Note: If crystals form in the GelCode® Glycoprotein Stain, centrifuge solution and remove the supernatant for use. DO
NOT HEAT to dissolve crystals. Only use stain after crystals have been removed.
6. Transfer gel to 25 ml of Reducing Solution and gently agitate for 5 minutes.
7. Wash gel extensively with 3% acetic acid and then with ultrapure water. Glycoproteins appear as magenta bands. Store
gel in 3% acetic acid.
ken iemand mij een verklaring geven waarom ik eerst moet oxideren en na incubatie met het kleurreagens moet reduceren (zonder dan nog eerst te wassen)?
en waarom azijnzuur? is dat niet redelijk nefast voor eiwitten?
Laatste berichten
- 13:58 Standaardafwijking en variatiecoëfficiënt 1
- 10:53 terugkoppeling 13
- 23:06 raadsel: rolletjes 17
- 22:49 Biomassa 2
- 13 jun Randomisatie 7
- 13 jun fourier 8
- 12 jun Magnesium: cofactor voor ATP-verbruikende enzymen 1
- 12 jun Berkenen dwarskracht op buis 2
- 12 jun arbeid 6
- 12 jun Casus uit de praktijk: positief test THC 63
- 11 jun [wiskunde] Hoe maak je x vrij in 1/2(cos(4x))=cos(4x) 5
- 11 jun Muziektopic 1854
- 11 jun Straatklok loopt 5 minuten voor 22
- 10 jun hoogte 13
- 09 jun objecten 8
- 09 jun [wiskunde] Verwarring met som- en verschilformules 5
- 08 jun Wafer 7
- 07 jun Dark Energy 28
- 07 jun 'Seahenge' prehistorische poging om periode van klimaatverandering te keren?
- 07 jun EV laden met 8 vs 13 A 8
Nieuwsberichten
glycokleuring
Moderator: ArcherBarry
Forumregels
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
(Middelbare) school-achtige vragen naar het forum "Huiswerk en Practica" a.u.b.
Zie eerst de Huiswerkbijsluiter
-
- Berichten: 1
glycokleuring
waar leven we nou in en wat is de bedoeling van het leven